[发明专利]一种短肽、载铜纳米生物材料及在制备治疗脑梗死的药物中的应用

说明书

技术领域

本发明属于生物材料领域，特别涉及自组装短肽、含自组装短肽的载铜纳米生物材料及其在制备治疗脑梗死的药物中的应用。

背景技术

自组装短肽是一种新型的纳米生物材料，自20世纪90年代问世以来，受到了人们的广泛重视，得到了快速的发展，并在细胞三维培养及制备疏水药物载体、止血药物、烧伤治疗药物、抑菌药物、白血病治疗或预防药物等方面应用。但是，制备出更多的自组装短肽、扩大自组装短肽的应用范围仍然是科技工作者关注的问题。

脑卒中是世界上第三大致死性的疾病，是导致人死亡和残疾的主要原因之一。脑梗死 (cerebral infarction, CI) 又称缺血性脑卒中，是由于血管狭窄或闭塞所致脑部血液供应障碍，引起相应部位脑组织缺血、缺氧而坏死、软化的疾病，约占全部脑卒中的80%。目前，对脑梗死的治疗措施主要是超早期的溶栓治疗，尽早恢复缺血组织的血液循环。然而溶栓治疗有严格时间窗的限制(<3h)， 临床上只有不到5%的脑梗死患者能够得到溶栓治疗。如果溶栓治疗超过了时间窗，则会导致缺血再灌注损伤，使得病情进一步加重。目前基础实验证明有效的各种神经保护药物，一旦应用到临床上，效果甚微。因此对于缺血性脑卒中，如何采取有效的治疗措施减少神经功能缺损，提高患者生存质量，这就成了当务之急。

发明内容

本发明的目的在于提供一种自组装短肽和含自组装短肽的载铜纳米生物材料，本发明的再一目的是证明载铜纳米生物材料对梗死的脑组织有明显的神经血管再生功能，以便开发出一类治疗脑梗死的新型药物。

本发明所述自组装短肽，命名为RP，其氨基酸序列为序列表中SEQ ID NO：1所述，其理论分子量为3066.15道尔顿。本发明所述载铜纳米生物材料，为上述RP自组装短肽、RAD16-II自组装短肽、CuSO₄和灭菌去离子水配制成的混合溶液所形成的凝胶状物质，所述混合溶液中，RP自组装短肽的浓度为0.1mM～4mM，RAD16-II自组装短肽的浓度为2mM～~8mM、CuSO₄的浓度为10μM～100μM，所述RAD16-II自组装短肽已公开[见Shuguang Zhang. Designer self-assembling peptide nanofiber scaffolds for 3D tissue cell cultures. Seminars in Cancer Biology 15 (2005) 413–420]，其氨基酸序列为序列表中SEQ ID NO：2所述。本发明所述载铜纳米生物材料，其制备方法如下：

（1）去离子水的灭菌处理

将去离子水在蒸汽压103.4kPa、温度121.3℃下处理至少30分钟，然后冷却至室温；

（2）原料溶液的配制

在室温、常压下将CuSO₄用步骤（1）灭菌处理的去离子水配制成CuSO₄溶液，然后在超净台的无菌环境中将CuSO₄溶液用0.22μm的一次性滤器过滤除菌，所述CuSO₄溶液中，CuSO₄的浓度是上述形成凝胶状物质的混合液中的CuSO₄浓度的2倍~4倍；

在超净台的无菌环境中于室温、常压下将RP自组装短肽用步骤（1）灭菌处理的去离子水配制成RP自组装短肽溶液，所述RP自组装短肽的氨基酸序列为序列表中SEQ ID NO：1所述，所述RP自组装短肽溶液中，RP自组装短肽的浓度是上述形成凝胶状物质的混合液中的RP自组装短肽浓度的2倍~4倍；

在超净台的无菌环境中于室温、常压下将RAD16-II自组装短肽用步骤（1）灭菌处理的去离子水配制成RAD16-II自组装短肽溶液，所述RAD16-II自组装短肽的氨基酸序列为序列表中SEQ ID NO：2所述，所述RAD16-II自组装短肽溶液中，RAD16-II自组装短肽的浓度是上述形成凝胶状物质的混合液中的RAD16-II自组装短肽浓度的2倍~4倍；

（3）混合液的配制