[发明专利]利用AFLP指纹技术鉴定中国对虾种群的方法无效
申请号: | 201210186627.1 | 申请日: | 2012-06-08 |
公开(公告)号: | CN102676687A | 公开(公告)日: | 2012-09-19 |
发明(设计)人: | 高天翔;张辉;张朝晖;李鹏飞 | 申请(专利权)人: | 中国海洋大学 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12N15/11 |
代理公司: | 青岛海昊知识产权事务所有限公司 37201 | 代理人: | 曾庆国 |
地址: | 266100 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 利用 aflp 指纹 技术 鉴定 中国 对虾 种群 方法 | ||
1.用于鉴定中国对虾种群的引物组,其特征在于,包括有四对引物,每对引物的正向引物、反向引物的序列分别为:SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6和SEQ ID NO:7。
2.权利要求1所述的引物组的应用,是用于对中国对虾种群进行遗传鉴定。
3.如权利要求2所述的遗传鉴定,包括有如下的步骤:
1)样品基因组DNA的提取;
2)酶切反应;用EcoR I和Mse I对1)中的DNA进行酶切
3)连接反应:将2)中获得的酶切产物连接上EcoR I接头和Mse I接头;
4)预扩增反应:用EcoR I preprimer和Mse I preprimer对3)中获得的连接产物进行预扩增;
5)选择性扩增:将预扩增产物稀释后,分别用SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:5、SEQ IDNO:6和SEQ ID NO:7的引物对进行扩增;且序列为SEQ ID NO:1、SEQ IDNO:4、SEQ ID NO:6的引物的5′用FAM荧光标记;
6)结果分析:将步骤5)的扩增产物用ABI3730条带分型,读取结果后进行种群分析。
4.如权利要求3所述的遗传鉴定,其特征在于,所述的EcoR I preprimer和Mse I preprimer的核苷酸序列分别为SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:9。
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