[发明专利]由万能干细胞所分化的神经上皮细胞的培养方法及培养基

权利要求书

1.一种神经诱导培养基，其特征在于，它包含有Wnt信号激动剂、转化因子β信号抑制剂及纤维母细胞生长因子信号激动剂。

2.如权利要求1所述的神经诱导培养基，其特征在于，所述Wnt信号激动剂选自Wnt ligands和肝醣合成酶激酶-3β抑制剂中的一种或多种。

3.如权利要求1或2所述的神经诱导培养基，其特征在于，所述Wnt信号激动剂为浓度介于0.05μM至50μM间的药物Bio。

4.如权利要求1所述的神经诱导培养基，其特征在于，所述转化因子β信号抑制剂选自骨形态发生蛋白质抑制剂、chordin蛋白质、noggin蛋白质、dorsomorphin蛋白质、Smad1抑制剂、Activin/Nodal受体抑制剂药物及Smad2/3抑制剂中的一种或多种。

5.如权利要求1或4所述的神经诱导培养基，其特征在于，所述转化因子β信号抑制剂为浓度介于1μM至100μM间的药物SB431542。

6.如权利要求1所述的神经诱导培养基，其特征在于，所述纤维母细胞生长因子信号激动剂选自纤维母细胞生长因子2、纤维母细胞生长因子受体的配体、活化胞外信号调控激酶的促进剂、活化c-jun N端蛋白质激酶的促进剂及活化磷脂酰肌醇3激酶的促进剂中的一种或多种。

7.如权利要求1或6所述的神经诱导培养基，其特征在于，所述纤维母细胞生长因子信号激动剂为浓度介于1ng/mL至100ng/mL间的纤维母细胞生长因子2。

8.一种如权利要求1所述的神经诱导培养基的用途，其特征在于，其是将该培养基用于将万能干细胞培养分化成神经上皮细胞。

9.一种将万能干细胞分化成神经上皮细胞的分化方法，它包含有下列步骤：

步骤a：将万能干细胞悬浮培养形成类胚体；

步骤b：将该类胚体培养于第一神经诱导培养基中，分化形成神经上皮细胞；

其特征在于：

所述第一神经诱导培养基选自如权利要求1至7中任意一项所述的神经诱导培养基。

10.如权利要求9所述的将万能干细胞分化成神经上皮细胞的分化方法，其特征在于，所述方法还包含有一步骤c，将所述第一神经诱导培养基更换为第二神经诱导培养基，使该被培养细胞继续分化为神经上皮细胞。

11.如权利要求9所述的将多能干细胞分化成神经上皮细胞的分化方法，其特征在于，所述第二神经诱导培养基至少由神经干细胞培养基、N2神经细胞生长添加剂、非必须胺基酸及肝素所组成。

12.如权利要求9、10或11所述的将万能干细胞分化成神经上皮细胞的分化方法，其特征在于，所述步骤a的万能干细胞为人类的胚胎干细胞株及诱导型万能干细胞中的一种或多种。