[发明专利]一种长匍茎树发素的提取分离方法

说明书

技术领域

本发明属于医药技术领域，公开了一种长匍茎树发素的提取分离方法。

背景技术

长匍茎树发素，为苯并呋喃类化合物，无色针晶，mp.291℃。分子式为C₁₅H₁₀O₆，分子量为286.24。结构式：

。

长匍茎树发素具有抗菌活性。对革兰阳性菌有弱抗菌活性。对金黄色葡萄球菌和包皮垢分支杆菌在25μg/mL时，有抗菌活性。

长匍茎树发素来源于松萝科(Usneaceae)长匐茎树发Alectoria sarmentosa Ach.目前对长匍茎树发素的研究较少，因此提供一种简便且易于工业化生产长匍茎树发素的方法具有重要的意义，为长匍茎树发素的开发研究奠定了基础。

发明内容

本发明的目的是提供一种长匍茎树发素的提取分离方法，具体来说，是采用柱层析和高速逆流色谱结合的方法制备长匍茎树发素。

本发明所述的一种长匍茎树发素的提取分离方法，其特征在于包含以下步骤：

（1）提取：以长匍茎树发为原料，置于萃取釜中，进行超临界二氧化碳萃取，萃取压力为20-40MPa，萃取温度为30-55℃，解析压力为6-10MPa，解析温度为25-45℃，萃取1-4h，得到长匍茎树发素粗提物；

（2）柱层析：粗提物用氯仿溶解，用硅胶拌样，挥干氯仿，上中压硅胶柱层析，石油醚-乙酸乙酯混合溶液梯度洗脱，收集目标流分；

（3）高速逆流色谱：将目标流分浓缩，注入高速逆流色谱仪，以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水为溶剂体系，上相为固定相，下相为流动相，紫外在线监测，收集高浓度流分；

（4）结晶：将高浓度流分减压浓缩，放置结晶，真空干燥，得到针晶。

所述步骤（1）中CO₂流量为20-60kg/h。

所述步骤（2）中硅胶为100-300目，柱径高比为1:7-15，压力控制在0.6-0.9MPa，石油醚-乙酸乙酯体积比为4:1-15。

所述步骤（3）正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水体积比为3-6:4-7:5-9:3。

本发明的积极效果为：本发明制备的长匍茎树发素纯度高、样品损失少、制备量大，易于实现工业化生产。

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式

实施例1：

以长匍茎树发为原料，取1kg，粉碎，置于萃取釜中，进行超临界二氧化碳萃取，CO₂流量为20kg/h，萃取压力为20MPa，萃取温度为35℃，解析压力为10MPa，解析温度为25℃，萃取1h，得到长匍茎树发素粗提物，用氯仿溶解，用硅胶拌样，硅胶为100目，挥干氯仿，上中压硅胶柱层析，柱径高比为1:7，压力控制在0.6MPa，石油醚-乙酸乙酯混合溶液4:1、1:1、1:4、1:10、1:15梯度洗脱，收集目标流分，将目标流分浓缩，注入高速逆流色谱仪，以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水为溶剂体系，体积比为3:4:5:3，上相为固定相，下相为流动相，紫外在线监测，收集高浓度流分，减压浓缩，放置结晶，真空干燥，得到长匍茎树发素针晶，含量99.3%。

实施例2：

以长匍茎树发为原料，取1kg，粉碎，置于萃取釜中，进行超临界二氧化碳萃取，CO₂流量为60kg/h，萃取压力为40MPa，萃取温度为30℃，解析压力为6MPa，解析温度为45℃，萃取4h，得到长匍茎树发素粗提物，用氯仿溶解，用硅胶拌样，硅胶为300目，挥干氯仿，上中压硅胶柱层析，柱径高比为1:15，压力控制在0.9MPa，石油醚-乙酸乙酯混合溶液4:1、1:1、1:4、1:10、1:15梯度洗脱，收集目标流分，将目标流分浓缩，注入高速逆流色谱仪，以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水为溶剂体系，体积比为6:7:9:3，上相为固定相，下相为流动相，紫外在线监测，收集高浓度流分，减压浓缩，放置结晶，真空干燥，得到长匍茎树发素针晶，含量97.5%。

实施例3：