[发明专利]利用HPLC测定葡萄和柑橘果实中17种酚类物质的方法

权利要求书

1.一种利用HPLC测定葡萄和柑橘果实中17种酚类物质的方法，其特征在于：葡萄酚类的测定方法包括以下步骤： 

（1）标准品：没食子酸、儿茶素、表儿茶素、绿原酸、咖啡酸、丁香酸、香豆酸、芦丁、阿魏酸、苯甲酸、橙皮苷、柚皮苷、水杨酸、槲皮素、白藜芦醇、川陈皮素、桔皮素购自sigma公司；

（2）样品前处理

称取2-3g冻干果实样品，加入质量分数为50%的乙醇研磨，用乙酸乙酯萃取2次，收集萃取液，减压浓缩至干，加入2ml甲醇与DMSO的体积比为1:1的混合溶液溶解；

（3）色谱条件

色谱柱Merck LiChrospher_100RP18e，250mm×4.0mm；检测波长：0-20min:230nm；20-35min:280nm；35-42min:309nm；42-60min：320nm；柱温：30℃；梯度洗脱：流动相A为水﹕乙酸=98﹕2；流动相B为乙腈；洗脱程序：0min→100min，乙腈：16%→70%，2%醋酸水混合液：84%→30%；流速：0.8ml/min。

2.一种利用HPLC测定葡萄和柑橘果实中17种酚类物质的方法，其特征在于：柑橘果皮果肉的测定方法包括以下步骤： 

（1）标准品：没食子酸、绿原酸、咖啡酸、丁香酸、香豆酸、芦丁、阿魏酸、橙皮苷、柚皮苷、水杨酸、槲皮素、川陈皮素，桔皮素，儿茶素，表儿茶素、苯甲酸、白藜芦醇购自sigma公司；

（2）样品前处理

先将样品果肉与果皮分离冷冻干燥过60目备用；称取0.1g样品用1mL甲醇与DMSO的体积比为1:1的混合溶液于室温浸泡10min；9000rpm，4℃离心15min，重复3次，合并上清液于容量瓶中，用甲醇定容；用0.45μm微孔滤膜过滤备用；

（3）色谱条件

色谱柱Merck LiChrospher_100RP18e，250mm×4.0mm；检测波长：0-20min:230nm；20-35min:280nm；35-42min:309nm；42-60min：280nm；柱温：30℃；梯度洗脱：流动相A为水﹕乙酸=98﹕2；流动相B为乙腈，洗脱程序：0min→100min，乙腈：16%→70%，2%醋酸水混合液：84%→30%；流速：0.8ml/min。