[发明专利]杂色鲍血蓝蛋白Ⅰ和Ⅱ型亚基基因及克隆方法无效
申请号: | 201210179890.8 | 申请日: | 2012-06-01 |
公开(公告)号: | CN102719440A | 公开(公告)日: | 2012-10-10 |
发明(设计)人: | 姜敬哲;张晗;王江勇;彭文;韩焘 | 申请(专利权)人: | 中国水产科学研究院南海水产研究所 |
主分类号: | C12N15/12 | 分类号: | C12N15/12;C07K14/795;C12N15/10 |
代理公司: | 广州知友专利商标代理有限公司 44104 | 代理人: | 宣国华;马赟斋 |
地址: | 510300 *** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 杂色 鲍血蓝 蛋白 型亚基 基因 克隆 方法 | ||
1.杂色鲍血蓝蛋白Ⅰ型亚基基因,它的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.杂色鲍血蓝蛋白Ⅰ型亚基蛋白,它的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
3.杂色鲍血蓝蛋白Ⅱ型亚基基因,它的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。
4.杂色鲍血蓝蛋白Ⅱ型亚基蛋白,它的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。
5.杂色鲍血蓝蛋白Ⅰ型亚基基因和Ⅱ型亚基基因全序列的克隆方法:以杂色鲍肌肉为材料提取基因组DNA,对得到的基因组DNA进行片段化处理,然后对DNA断裂末端进行补齐和磷酸化修复,然后进行电泳分离片段化DNA,回收38kb-48kb的DNA片段,所回收的DNA片段与pCC1FOS载体连接,再经噬菌体包装并转染大肠杆菌,经过酶切与测序鉴定后制备了杂色鲍基因组文库,制备杂色鲍基因组文库甘油菌,用HdHc1和HdHc2的上、下游引物通过PCR方法筛选阳性克隆,经测序,最终筛选到杂色鲍血蓝蛋白Ⅰ型和Ⅱ型亚基基因的核苷酸全序列。
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