[发明专利]杂色鲍血蓝蛋白Ⅰ和Ⅱ型亚基基因及克隆方法无效

专利信息
申请号: 201210179890.8 申请日: 2012-06-01
公开(公告)号: CN102719440A 公开(公告)日: 2012-10-10
发明(设计)人: 姜敬哲;张晗;王江勇;彭文;韩焘 申请(专利权)人: 中国水产科学研究院南海水产研究所
主分类号: C12N15/12 分类号: C12N15/12;C07K14/795;C12N15/10
代理公司: 广州知友专利商标代理有限公司 44104 代理人: 宣国华;马赟斋
地址: 510300 *** 国省代码: 广东;44
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摘要:
搜索关键词: 杂色 鲍血蓝 蛋白 型亚基 基因 克隆 方法
【权利要求书】:

1.杂色鲍血蓝蛋白Ⅰ型亚基基因,它的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

2.杂色鲍血蓝蛋白Ⅰ型亚基蛋白,它的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。

3.杂色鲍血蓝蛋白Ⅱ型亚基基因,它的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。

4.杂色鲍血蓝蛋白Ⅱ型亚基蛋白,它的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。

5.杂色鲍血蓝蛋白Ⅰ型亚基基因和Ⅱ型亚基基因全序列的克隆方法:以杂色鲍肌肉为材料提取基因组DNA,对得到的基因组DNA进行片段化处理,然后对DNA断裂末端进行补齐和磷酸化修复,然后进行电泳分离片段化DNA,回收38kb-48kb的DNA片段,所回收的DNA片段与pCC1FOS载体连接,再经噬菌体包装并转染大肠杆菌,经过酶切与测序鉴定后制备了杂色鲍基因组文库,制备杂色鲍基因组文库甘油菌,用HdHc1和HdHc2的上、下游引物通过PCR方法筛选阳性克隆,经测序,最终筛选到杂色鲍血蓝蛋白Ⅰ型和Ⅱ型亚基基因的核苷酸全序列。

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