[发明专利]结核分枝杆菌Rv3120的重组蛋白、其制备方法及其在细胞免疫诊断中的应用

权利要求书

1.一种结核分枝杆菌Rv3120重组蛋白，其特征在于，其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示，通过使用pET32a质粒，在Rv3120该天然蛋白序列前面加了一段Trx·Taq和S·Taq融合标签及His·Tag纯化标签。

2.根据权利要求1所述的Rv3120重组蛋白，其特征在于，所述Trx·Taq和S·Taq融合标签及His·Tag纯化标签的氨基酸序列由SEQ ID NO:1中从氨基末端第1至第153位氨基酸残基序列组成。

3.一种编码权利要求1或2的Rv3120重组蛋白的核苷酸序列，其特征在于具有选自下列c）、d）或e）的核苷酸序列：

c）SEQ ID NO:2所示的核苷酸序列；

d）不同于SEQ ID NO:2但编码的氨基酸序列与SEQ ID NO:2所编码的氨基酸序列相同的核苷酸序列；

e）在严格杂交条件下与上述c）或d）中的序列杂交，并且编码具有所述Rv3120重组蛋白活性的核苷酸序列。

4.根据权利要求1或2所述的结核分枝杆菌Rv3120重组蛋白的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）制备结核分枝杆菌菌株基因组DNA；

（2）扩增Rv3120基因；

（3）Rv3120基因插入表达质粒；

（4）将构建的表达质粒转化入宿主细胞；

（5）诱导表达蛋白Rv3120；

（6）分离纯化诱导表达产物，得到Rv3120重组蛋白，

其中，在制备结核分枝杆菌Rv3120基因中采用的引物为Rv3120-F和Rv3120-R，所述引物Rv3120-F的核苷酸序列如SEQ ID No:3所示，所述引物Rv3120-R的核苷酸序列如SEQ ID No:4所示。

5.权利要求1或2所述的结核分枝杆菌Rv3120蛋白在制备检测或诊断结核病的试剂中的应用。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述Rv3120重组蛋白的基因引物为Rv3120-F和Rv3120-R，所述Rv3120-F的核苷酸序列为如SEQ ID No:3所示，所述Rv3120-R的核苷酸序列为如SEQ ID No:4所示。

7.权利要求1或2所述的结核分枝杆菌Rv3120重组蛋白、其特异性抗体或其基因引物在制备结核病检测试剂盒中的应用。

8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述Rv3120重组蛋白的基因引物为Rv3120-F和Rv3120-R，所述Rv3120-F的核苷酸序列为如SEQ ID No:3所示，所述Rv3120-R的核苷酸序列为如SEQ ID No:4所示。

9.一种结核病检测试剂盒，其特征在于，其组分中的检测抗原是权利要求1或2所述的结核分枝杆菌Rv3120重组蛋白。