[发明专利]基于凝胶的核酸等温扩增试剂的保存方法有效
申请号: | 201210178918.6 | 申请日: | 2012-06-01 |
公开(公告)号: | CN102703427A | 公开(公告)日: | 2012-10-03 |
发明(设计)人: | 张庆利;黄倢;史成银;梁艳;王勤涛;李美霞 | 申请(专利权)人: | 中国水产科学研究院黄海水产研究所 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 青岛海昊知识产权事务所有限公司 37201 | 代理人: | 张中南;曾庆国 |
地址: | 266071 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 基于 凝胶 核酸 等温 扩增 试剂 保存 方法 | ||
1.一种基于凝胶的核酸等温扩增试剂的保存方法,其特征在于所述的保存方法是将一种或几种核酸等温扩增反应液的组分包埋在凝胶内进行保存。
2.如权利要求1所述的保存方法,其特征在于所述的凝胶,其熔点低于用于核酸等温扩增的聚合酶的灭活温度。
3.如权利要求2所述的保存方法,其特征在于所述的凝胶,还包括有熔点高于核酸等温扩增的聚合酶的灭活温度的凝胶,且熔点高于核酸等温扩增的聚合酶的灭活温度的凝胶的添加质量不高于熔点低于核酸等温扩增的聚合酶的灭活温度的凝胶的10%。
4.如权利要求1所述的保存方法,其特征在于所述的核酸等温扩增反应液的组分为用于核酸等温扩增的聚合酶。
5.如权利要求4所述的保存方法,其特征在于所述的核酸等温扩增反应液的组分还包括有引物、三磷酸脱氧核苷酸dNTP和/或三磷酸核苷酸NTP、核酸等温扩增的聚合酶的反应缓冲液的任一种或几种。
6.如权利要求4或5所述的保存方法,其特征在于所述的核酸等温扩增的聚合酶为DNA聚合酶和/或RNA逆转录酶。
7.如权利要求4或5所述的保存方法,其特征在于所述的核酸等温扩增的聚合酶为DNA聚合酶和/或RNA聚合酶。
8.如权利要求5所述的保存方法,其特征在于所述的核酸等温扩增的聚合酶的反应缓冲液为依赖核酸序列的扩增的反应缓冲液、链替代扩增反应缓冲液或环介导等温扩增反应缓冲液。
9.如权利要求1所述的保存方法,其特征在于操作步骤如下:首先将可形成凝胶的物质添加到核酸等温扩增反应液的组分中,然后在低于核酸等温扩增聚合酶的灭活温度下将凝胶熔解,最后冷却凝固进行保存。
10.如权利要求1所述的保存方法,其特征在于操作步骤如下:首先将可形成凝胶的物质与水混合加热使之溶解配成浓缩的母液,然后将浓缩的母液加入到核酸等温扩增反应液的组分中,最后让温度下降使混合物由液态凝固为固态或半固态的凝胶进行保存。
11.如权利要求9或10所述的保存方法,其特征在于所述的可形成凝胶的物质在核酸等温扩增反应液的组分中的添加浓度质量体积百分比g/ml为0.01%~30%。
12.如权利要求9或10所述的保存方法,其特征在于所述的可形成凝胶的物质为能形成凝胶的多糖类物质和/或明胶类物质。
13.如权利要求12所述的保存方法,其特征在于所述的多糖类物质和/或明胶类物质为淀粉、糊精、凝结多糖、结冷胶、黄原胶、槐豆胶、亚麻籽胶、魔芋胶、壳聚糖、琼脂、琼脂糖、低熔点琼脂糖、超低熔点琼脂糖、红藻胶、海藻酸、海藻酸盐、卡拉胶、果胶、低甲氧基果胶、明胶、阿拉伯胶中的任一种或几种。
14.如权利要求9或10所述的保存方法,其特征在于所述的可形成凝胶的物质为能形成凝胶的人工聚合物。
15.如权利要求14所述的能形成凝胶的人工聚合物为甲基纤维素、羧甲基纤维素、丙烯酰胺、聚丙烯酰胺中的任一种或几种。
16.如权利要求13所述的保存方法,其特征在于所述的凝结多糖在核酸等温扩增反应液的组分中的添加浓度质量体积百分比g/ml为0.2%~3%。
17.如权利要求13所述的保存方法,其特征在于所述的超低熔点琼脂糖在核酸等温扩增反应液的组分中的添加浓度质量体积百分比g/ml为0.3%~3.5%。
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