[发明专利]一种楤白皮总皂苷及其制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明属于植物药用活性成分技术领域，涉及一种楤白皮总皂苷及其制备方法和应用。

背景技术

从天然动、植物中寻找低毒、高效的抗癌活性成分是新药研究的重要途径。秦巴山区是我国天然药物资源最为丰富的区域之一，其中一些从秦巴地区太白山某些中草药提取的有效成分已被《美国药典》录入或用于临床肿瘤的治疗之中，因此近年来太白山传统中草药成为新药研究的重点领域。

发明内容

本发明解决的问题在于从太白山中草药中的一种自五加科植物楤木的根皮（亦称飞天蜈蚣七）中提取药用活性成分，提供一种楤白皮总皂苷及其制备方法，所提取的总皂苷具有抗肿瘤活性。

本发明是通过以下技术方案来实现：

一种楤白皮总皂苷，是从楤木的根皮当中提取得到的，其提取为：

楤木的根皮经乙醇-水溶液浸渍后加热回流提取，提取液上样于大孔吸附树脂，用水洗脱至流出液无色后再用乙醇-水溶液梯度洗脱，收集洗脱馏分后回收乙醇，然后用乙酸乙酯萃取，将乙酸乙酯萃取液干燥后得到楤白皮总皂苷。

一种楤白皮总皂苷的制剂，以楤白皮总皂苷为药用成分，将其制备成的固体或液体形式的制剂。

所述的固体形式为片剂、颗粒剂、胶囊剂，液体形式为溶液、糖浆剂，

所述的楤白皮总皂苷对肿瘤细胞抑制的应用。

所述的楤白皮总皂苷用于抗肿瘤药物的制备的应用。

一种楤白皮总皂苷的制备方法，包括以下步骤：

1）将楤木的根皮经冲洗、干燥后粉碎，然后加入乙醇-水溶液浸渍8～12h，浸渍后加热回流提取1～5h，回流提取完成后收集提取液，减压回收乙醇，浓缩得到浓缩液；

2）浓缩液加水后搅拌均匀，静止12～24h后抽滤；将滤液上大孔吸附树脂，先用水洗脱至流出液无色，然后再用乙醇-水溶液按照体积浓度30～80%进行梯度洗脱；收集乙醇梯度大于50%洗脱的洗脱液，并回收洗脱液中的乙醇，浓缩得到二次浓缩液；

3）将二次浓缩液喷雾干燥或真空干燥后得到药物干燥粉；

4）将药物干燥粉加水溶解均匀后加入乙酸乙酯萃取，萃取多次后合并乙酸乙酯萃取液，减压浓缩得到三次浓缩液，三次浓缩液真空干燥后得到楤白皮总皂苷。

所述的乙醇-水溶液中乙醇的体积浓度为30～85%，其余为水。

所述的浓缩液或二次浓缩液的相对密度为1.06～1.10，三次浓缩液的相对密度为0.90～0.95。

所述的大孔吸附树脂为D-101、HPD722、AB-8或DS401树脂柱。

所述的梯度洗脱的流速为0.5～2ml/min，时间为2～24h。

所述的喷雾干燥时采用热风干燥，进风温度为160～180℃，出风温度为70～100℃，雾化器转速为80转/秒至200转/秒；

真空干燥时，真空度为0.09～0.15Mpa，温度为50～80℃干燥20～40小h。

与现有技术相比，本发明具有以下有益的技术效果：

本发明提供的楤白皮总皂苷，是以楤木的根皮（飞天蜈蚣七）作为原料，通过回流提取、树脂分离纯化、乙酸乙酯萃取得到的具有药用活性的总皂苷。该总皂苷能够作为药用成分通过制剂得到中成药，方便使用，提高药用的安全性。

本发明提供的楤白皮总皂苷对肿瘤细胞具有明显的抑制作用：楤白皮总皂苷进行了抗肿瘤提取物对体外培养的H22肝癌细胞、FBL3白血病细胞和B16黑色素瘤细胞均具有明显的抑制作用，楤白皮总皂苷体外对FBL₃和B₁₆细胞的作用IC₅₀分别为0.199g·L^-1和0.0774g·L^-1；在上述浓度下，对H₂₂细胞的抑制率均超过80%，能够应用于抗肿瘤药物的制备。

本发明提供的楤白皮总皂苷具有较高的安全性：楤木皂苷一次性灌胃给药的LD50为3265mg/kg，LD50的95％可信限为2931～3639mg/kg。

附图说明

图1为分光光度法的检测楤白皮总皂苷浓度和吸光度关系曲线；

图2为楤白皮总皂苷不同时间点对FBL3细胞的抑制作用；

图3为楤白皮总皂苷对H22、B16和FBL3肿瘤细胞的抑制作用。

具体实施方式

本发明提供一种楤白皮总皂苷及其制备方法和应用，从传统太白山中草药飞天蜈蚣七中提取具有药用效果的总皂苷。下面结合具体的实施例对本发明做进一步的详细说明，所述是对本发明的解释而不是限定。