[发明专利]转基因玉米标准样品、其建立方法及应用

权利要求书

1.一种转基因玉米MIR162标准样品，其特征在于，制备方法包括：

（1）将原料研磨成粉末，过100目筛，将过筛后的粉末收集，向粉末中加入等质量的水，搅拌均匀后，静置1h，弃上清，将沉淀物制备成冻干粉；

（2）以转基因玉米MIR162为原料，按照步骤（1）所述方法制备冻干粉；

（3）以非转基因玉米为原料，按照步骤（1）所述方法制备冻干粉；

（4）将步骤（2）制备的冻干粉与步骤（3）制备的冻干粉按1∶100的重量比例混合，向混合粉末中加入等质量的水，搅拌均匀后，静置1h，弃上清，将沉淀物制备成冻干粉并分装,0℃~4℃贮存；

上述步骤（1）~（4）中任一项所述的冻干粉，其具体制备步骤包括：

①样品预冻：先把样品在-80℃冷冻2h；

②冷冻过程：关好冰冻干燥机的干燥室门，开始干燥室制冷；干燥室温度降至-35℃时，开始冷却阱制冷；冷却阱制冷温度降至-40℃时，将步骤①处理的样品迅速放入干燥室内，关好干燥室门；启动真空泵开始抽真空；当真空度降至0.5Torr时，结束冷冻过程；

③样品干燥：干燥室的温度设置为15℃,当真空度降至0.1Torr时，样品已干燥好；

④关闭真空泵，使干燥室与外界大气相通，待内外气压平衡后，打开干燥室门，取出样品，迅速旋紧瓶盖。

2.一种转基因玉米MIR162的Real-Time PCR检测试剂盒，其特征在于，包括转基因玉米MIR162检测基因和阳性标准对照品：

阳性标准对照品：是权利要求2所述的转基因玉米MIR162标准样品；

转基因玉米MIR162检测基因，包括：

品系鉴定基因的检测引物和探针序列:

正向引物        SEQ ID NO：1

反向引物        SEQ ID NO：2

探针            SEQ ID NO：3

zSSIIb基因的检测引物和探针序列:

正向引物        SEQ ID NO：4

反向引物        SEQ ID NO：5

探针            SEQ ID NO：6。