[发明专利]一株发酵刺五加提高刺五加中异秦皮啶含量的内生真菌

说明书

技术领域

本发明涉及一株内生真菌。

背景技术

刺五加为五加科植物刺五加(Acanthopanax senticosus(rupr.et Maxim.)Harms)的干燥根及根茎或茎，是既食又药功能性保健食品。刺五加的活性成分主要有：异秦皮啶、紫丁香苷、多糖等，具有抗疲劳，抗炎，抗氧化、免疫调节，降压，降血糖等作用，现广泛用于医药和食品行业。由于刺五加需求量上涨，森林面积逐渐减少以及盲目的采挖，使刺五加资源面临考验，目前刺五加是国家二类重点保护的濒危药用植物。

发酵技术可以使食品的某些活性成分发生增减变化，保护食品中某些活性成分，节省资源，为食品、药品活性成分的获得提供新方法。

发明内容

本发明提供了一株发酵刺五加提高刺五加中异秦皮啶含量的内生真菌。

本发明发酵刺五加提高刺五加中异秦皮啶含量的内生真菌，它为赭曲霉(Aspergillus ochraceus)AJ14，已在中国典型培养物保藏中心保藏，保藏编号为CCTCC No：M 2012042，保藏地址为武汉市武汉大学，保藏日期为2012年2月29日；它在PDA固体培养基上培养7d后，菌落直径为3～5cm，稍有放射状沟纹，具同心环纹，菌丝体白色，分生孢子面赭黄色，质地丝绒状，具少量无色渗出液，反面黄褐色，分生孢子头球形，分生孢梗茎壁粗糙，顶囊球形，直径25～45μm，表面全部可育，产孢结构双层，梗基大小为5～10μm×3～4μm，瓶梗大小为8～11μm×3～4μm；分生孢子球形，直径2.5～3.5μm。

本发明发酵刺五加提高刺五加中异秦皮啶含量的内生真菌，它为赭曲霉(Aspergillus ochraceus)AJ14，其ITS序列提交至NCBI网页，通过Blast搜索与所得到的序列相似性高的序列，并通过MEGA5.03软件构建系统进化树，AJ14菌株的ITS序列与赭曲霉属菌菌株的相似性都达到了98％以上，结合形态学观察结果，确定AJ14菌株为赭曲霉(Aspergillus ochraceus)。

本发明发酵刺五加提高刺五加中异秦皮啶含量的内生真菌，它为赭曲霉(Aspergillus ochraceus)AJ14，已在中国典型培养物保藏中心保藏，保藏编号为CCTCC No：M 2012042，保藏地址为武汉市武汉大学，保藏日期为2012年2月29日。

本发明采用分离自刺五加的内生真菌AJ14发酵刺五加，以刺五加中主要活性成分异秦皮啶为指标，比较其发酵前后异秦皮啶含量的动态变化，旨在提高主要活性成分异秦皮啶的含量，为高效利用刺五加，节省药源、开发新型功能性保健食品提供依据。关于采用内生真菌AJ14发酵刺五加的相关研究目前未见报道。

本发明刺五加内生真菌AJ14分离自健康的野生刺五加的茎。该菌株有孢子，其直径为25μm，通过形态学观察和18S rDNA序列分析鉴定为赭曲霉(Aspergillus ochraceus)，它能使刺五加中异秦皮啶含量显著提高，因此在以获得异秦皮啶为目的的原料生产中可以选择刺五加内生真菌AJ14发酵刺五加以提高得率，节省药源。

本发明发酵刺五加提高刺五加中异秦皮啶含量的内生真菌，它为赭曲霉(Aspergillus ochraceus)AJ14，采用AJ14对刺五加进行发酵，HPLC法测定刺五加发酵前后刺五加主要活性成分异嗪吡啶的含量，其结果显示，刺五加内生真菌AJ14能使刺五加主要活性成分异嗪吡啶在一定程度上得以显著提高，说明本发明对采用内生真菌AJ14发酵刺五加高效生产刺五加中的异秦皮啶成分、节省药源具有指导意义。

附图说明

图1为具体实施方式一中赭曲霉(Aspergillus ochraceus)AJ14的菌落形态图；

图2为具体实施方式一中赭曲霉(Aspergillus ochraceus)AJ14的孢子显微结构图；

图3为具体实施方式一中赭曲霉(Aspergillus ochraceus)AJ14基因组DNA的电泳图，其中M泳道表示Marker；

图4为具体实施方式一中赭曲霉(Aspergillus ochraceus)AJ14的系统进化树；

图5为具体实施方式一中异嗪吡啶对照品的HPLC色谱图，其中1表示异嗪吡啶；

图6为具体实施方式一中刺五加茎的HPLC色谱图，其中1表示异嗪吡啶；

图7为具体实施方式一中刺五加茎经AJ14发酵后的HPLC色谱图，其中1表示异嗪吡啶。

具体实施方式