[发明专利]一种突变型人表皮生长因子基因、蛋白及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种突变型人表皮生长因子基因，其特征在于核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。

2.权利要求1所述突变型人表皮生长因子基因编码的蛋白，其特征在于氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。

3.权利要求1所述突变型人表皮生长因子基因的制备方法，其特征在于以天然人表皮生长因子基因和猪表皮生长因子基因为模板，进行易错PCR和交错延伸PCR，获得表皮生长因子基因的重组突变文库，连接入噬菌体载体，转化宿主菌获得噬菌体文库，经过噬菌体拯救的方法扩增该噬菌体文库，用过表达表皮生长因子受体的细胞淘洗筛选，最终获得能与表皮生长因子受体稳定结合的噬菌体，将所得噬菌体与宿主菌孵育、扩增，进行细胞表面受体ELISA反应，最终筛选出权利要求1所述突变型人表皮生长因子基因。

4.一种突变型人表皮生长因子表达载体，其特征在于由权利要求1所述突变型表皮生长因子基因插入载体pET32a(+)的多克隆位点构建而成。

5.权利要求2所述突变型人表皮生长因子基因编码的蛋白的制备方法，其特征在于将SEQ ID NO:1所示突变型人表皮生长因子基因连接于表达载体pET32a(+)，转化宿主细胞，进行融合表达、纯化，得到突变型人表皮生长因子基因编码的蛋白。

6.权利要求1所述突变型人表皮生长因子基因在制备防治表皮生长因子受体表达异常引起的疾病的药物、诊断表皮生长因子受体表达异常引起的疾病的试剂、防治上皮损伤疾病的药物、促表皮生长恢复的药物和/或化妆品添加剂中的应用。