[发明专利]用于增加紫杉醇或以紫杉醇结构为基础的类似药物的溶解度的寡肽

权利要求书

1.一种用于增加紫杉醇或以紫杉醇结构为基础的类似药物的溶解度的寡肽，所述寡肽能够通过非共价的超分子相互作用与紫杉醇分子或以紫杉醇结构为基础的类似药物分子结合，其中，所述寡肽由3～20个氨基酸组成，其中，所述寡肽分子的结构包括在N端含有1~3个含有苯环的氨基酸，在寡肽分子的各个位置共含有1~10个氢键受体或氢键供体的官能团以及在N端或者从N端起三分之二区域包含所述寡肽的疏水区域的相对空间位置特征，从而使所述寡肽与紫杉醇进行空间对接，而在C端含有1-4个亲水基团。

2.根据权利要求1所述的用于增加紫杉醇或以紫杉醇结构为基础的类似药物的溶解度的寡肽，其中，所述含有苯环的氨基酸为色氨酸或苯丙氨酸。

3.根据权利要求1所述的用于增加紫杉醇或以紫杉醇结构为基础的类似药物的溶解度的寡肽，其中，所述氢键受体或氢键供体的官能团由选自Asp、Asn、Glu、Lys、Gln、Arg、Ser、Thr和Cys中的氨基酸提供。

4.根据权利要求1所述的用于增加紫杉醇或以紫杉醇结构为基础的类似药物的溶解度的寡肽，其中，所述亲水基团由选自Gly、Asp、His、Asn、Glu、Lys、Gln、Arg、Ser、Thr和Cys中的氨基酸提供。

5.根据权利要求1所述的用于增加紫杉醇或以紫杉醇结构为基础的类似药物的溶解度的寡肽，其中，所述寡肽的序列选自下列序列中：Nterminal-W(L)FFAREKD-C terminal、N terminal-W(L)FFSREKD-C terminal、N terminal-W(L)FFGREKD-C terminal、N terminal-W(D)FFAREKD-Cterminal、N terminal-W(D)FFSREKD-C terminal和Nterminal-W(D)FFGREKD-C terminal。

6.权利要求1～5中任一项所述的寡肽与紫杉醇或以紫杉醇结构为基础的类似药物的复合物，其中，紫杉醇或以紫杉醇结构为基础的类似药物与所述寡肽的质量比例为1:100~1:0.01，优选为1:0.5。

7.权利要求1～5中任一项所述的寡肽与紫杉醇或以紫杉醇结构为基础的类似药物的复合物的制备方法，所述方法包括：将紫杉醇或以紫杉醇结构为基础的类似药物配制成极性有机溶剂水溶液，并加入寡肽水溶液，搅拌后，蒸发除去极性有机溶剂。

8.根据权利要求7所述的制备方法，其中，紫杉醇或以紫杉醇结构为基础的类似药物与所述寡肽的质量比例为1:100~1:0.01，优选为1:0.5。

9.根据权利要求7所述的制备方法，其中，所述方法包括以下步骤：

1）使用极性有机溶剂配体积分数在60%-90%之间的极性有机溶剂的水溶液；

2）称取适量的紫杉醇或以紫杉醇结构为基础的类似药物，用极性溶剂的水溶液溶解并定容得到0.5–10mg/mL的紫杉醇或以紫杉醇结构为基础的类似药物的等摩尔浓度的溶液；

3）称取适量的权利要求1～5中任一项所述的寡肽，用水溶解并定容得到浓度为0.3-2.7μg·mL^-1的寡肽水溶液；

4）将紫杉醇或以紫杉醇结构为基础的类似药物的极性溶剂水溶液和寡肽水溶液混合，并于50～70℃搅拌1～6小时，其中搅拌速率优选为300r·min^-1；

5）蒸发除去极性有机溶剂。

10.一种增加紫杉醇或以紫杉醇结构为基础的类似药物的溶解度的方法，其包括：

（1）寡肽分子的设计步骤

1）根据紫杉醇分子或以紫杉醇结构为基础的类似药物分子的空间结构特点，选择合适的氨基酸单体；

2）将氨基酸单体进行适当组合后，在Amber软件下，对氨基酸序列在隐性水环境中以50K为步长进行逐渐升温，然后稳定在300K下跑250ns的动力学，最终得到稳定的寡肽构象；

3）使用对接软件Auto Dock Vina将优化后的寡肽分子对接到紫杉醇分子或以紫杉醇结构为基础的类似药物分子上，得到粗略的复合物结构和估计的结合自由能，并以此为参考筛选效果最好的寡肽分子，对于AutoDock Vina程序，搜索空间限定在以紫杉醇分子中心为中心，的区域内，每次产生10个最优构象，共进行5次并行操作，以结合自由能最低的构象作为最终构象；

4）对寡肽中的氨基酸残基进行增减或者调整次序，重新组合后再优化、再对接筛选，直至找到与紫杉醇的结合自由能更低、空间位置更加匹配的寡肽；

（2）寡肽增溶紫杉醇或以紫杉醇结构为基础的类似药物的溶液配制方法

1）使用极性有机溶剂配体积分数在60%-90%（优选80%）之间的极性有机溶剂的水溶液；

2）称取适量的紫杉醇或以紫杉醇结构为基础的类似药物，用极性溶剂的水溶液溶解并定容得到0.5–10mg/mL的紫杉醇或以紫杉醇结构为基础的类似药物的等摩尔浓度的溶液；

3）称取适量的寡肽，用水溶解并定容得到浓度为0.3-2.7μg·mL^-1的寡肽水溶液；

4）将紫杉醇或以紫杉醇结构为基础的类似药物的极性溶剂水溶液和寡肽水溶液混合于具塞锥形瓶中，将锥形瓶置于磁力搅拌器上，于50～70℃搅拌1～6小时，其中搅拌速率优选为300r·min^-1；

5）将锥形瓶中液体转移至圆底烧瓶中，真空旋转蒸发，除去极性有机溶剂后，用水少量多次将剩余物转移至容量瓶中，并定容；

6）取上述溶液过滤膜后，取滤液进入高效液相色谱测定紫杉醇含量。