[发明专利]介导ZMIZ1靶向敲除的转录激活子样效应因子核酸酶及其制法和应用

权利要求书

1.一种分离的多肽1，其特征在于，所述的多肽1任选自下组：

(1)具有SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:6所示氨基酸序列的多肽；或

(2)与SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:6所示氨基酸序列的多肽同源性≥90%，较佳地≥95%，更佳地≥98%，最佳地≥99%的多肽；

优选地，所述的多肽1具有选自下组的功能：

(1)特异性地识别序列如SEQ ID NO:10所述的核苷酸，或如SEQ ID NO:10所述的核苷酸经一个或多个（较佳地2个）核苷酸取代所衍生的核苷酸；

(2)特异性地识别序列如SEQ ID NO:13所述的核苷酸，或如SEQ ID NO:13所述的核苷酸经一个或多个（较佳地2个）核苷酸取代所衍生的核苷酸。

2.一种分离的多核苷酸1，其特征在于，所述的多核苷酸1选自下组：

(1)编码权利要求1所述多肽1的多核苷酸；

(2)具有SEQ ID NO:44或SEQ ID NO:45所示核苷酸序列的多核苷酸；

(3)与SEQ ID NO:44或SEQ ID NO:45所示核苷酸序列的同源性≥90%，较佳地≥95%，更佳地≥98%，最佳地≥99%的多核苷酸；

(4)与上述(1)-(3)互补的多核苷酸。

3.一种分离的多肽2，其特征在于，所述的多肽2包括：权利要求1所述的多肽1，和位于所述多肽1两端的转录激活子样效应因子氨基酸序列框架的N端和C端；

优选地，所述转录激活子样效应因子氨基酸序列框架的N端和C端为天然的，或人工改造的序列；

较佳地，5所述的多肽2任选自下组：

(1)具有SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:4所示氨基酸序列的多肽；或

(2)与SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:4所示氨基酸序列的多肽同源性≥90%，较佳地≥95%，更佳地≥98%，最佳地≥99%的多肽。

4.一种分离的多核苷酸2，其特征在于，所述的多核苷酸2选自下组：

(1)编码权利要求3所述多肽2的多核苷酸；

(2)具有SEQ ID NO:40或SEQ ID NO:41所示核苷酸序列的多核苷酸；

(3)与SEQ ID NO:40或SEQ ID NO:41所示核苷酸序列的同源性≥90%，较佳地≥95%，更佳地≥98%，最佳地≥99%的多核苷酸；

(4)与上述(1)-(3)互补的多核苷酸。

5.一种位点特异性的核酸酶，其特征在于，所述的核酸酶包括：权利要求3所述的多肽2，和DNA切割元件；

优选地，所述的核酸酶选自下组：

(1)具有SEQ ID NO:48或SEQ ID NO:49所示氨基酸序列的多肽；或

(2)与SEQ ID NO:48或SEQ ID NO:49所示氨基酸序列的多肽同源性≥90%，较佳地≥95%，更佳地≥98%，最佳地≥99%的多肽。

6.一种位点特异性的核酸酶二元组合物，其特征在于，所述的二元组合物由2个权利要求5所述的位点特异性的核酸酶组成。

7.一种分离的多核苷酸3，其特征在于，所述的多核苷酸3选自下组：

(1)编码权利要求5所述核酸酶的多核苷酸；

(2)具有SEQ ID NO:46或SEQ ID NO:48所示核苷酸序列的多核苷酸；

(3)与SEQ ID NO:46或SEQ ID NO:48所示核苷酸序列的同源性≥90%，较佳地≥95%，更佳地≥98%，最佳地≥99%的多核苷酸；

(4)与上述(1)-(3)互补的多核苷酸。

8.一种载体，其特征在于，它含有权利要求2所述的多核苷酸1，和/或权利要求4所述的多核苷酸2，和/或权利要求7所述的多核苷酸3。

9.一种宿主细胞，其特征在于，所述的宿主细胞含有权利要求8所述的载体或基因组中整合有权利要求2所述的多核苷酸1，和/或权利要求4所述的多核苷酸2，和/或权利要求7所述的多核苷酸3。

10.权利要求2所述的多核苷酸1，和/或权利要求4所述的多核苷酸2，和/或权利要求7所述的多核苷酸3的用途，其特征在于，用于制备预防和/或治疗人ZMIZ1基因突变相关疾病的药物。