[发明专利]一种梨茎尖组织培养快速繁殖方法

权利要求书

1.一种梨茎尖组织培养快速繁殖方法，其特征在于该方法包括以下步骤：

1）外植体的准备：取带芽枝条剪成单芽茎段，消毒后去除鳞片，切取裸芽接种于诱导培养基上；所述诱导培养基成分为1/2MS+6-BA 0.8~1.2mg/L+IBA 0.05~0.3mg/L+GA1.0~3.0mg/L+20~35g/L蔗糖+3~10g/L琼脂，培养基pH值为5.8-6.0；

2）丛生芽的诱导：在诱导培养基培养10~20d待芽长到0.5~3cm，切取新梢转接到新的诱导培养基上，30-40d新芽形成并生长，每3周在相同的培养基上继代1次，50~70d获得大量丛生芽；培养过程中，光照强度1500-2000lx，光照15~18h/d，温度25-28℃；

3）继代培养：采用继代培养基进行丛生芽继代培养，每30-40d继代增殖1次；培养条件为：光照强度1500-2000lx，光照16h/d，温度25-28℃；所述丛生芽继代培养基为1/2MS+6-BA1.5mg/L+IBA 0.05~0.3mg/L+20~35g/L蔗糖+3~10g/L琼脂，培养基pH值为5.8-6.0；

4）生根培养：切取1-1.5cm生长健壮的新梢转接到生根培养基上，暗处理5d后再转光下培养，培养50-60d得到生根苗；培养条件为：光照强度1500-2000lx，光照16h/d，温度25-28℃；所述生根培养基为1/2MS+IBA0.3~1.0mg/L+50~70g/L蔗糖+3~10g/L琼脂，培养基PH值为5.8-6.0。

2.根据权利要求1所述的一种梨茎尖组织培养快速繁殖方法，其特征在于1）外植体的准备：将带芽枝条剪成单芽茎段，用洗衣粉漂洗，再用自来水冲洗30min，而后在超净工作台上用75%的酒精消毒20s，再用0.1%的升汞溶液消毒8-10min，最后用无菌水冲洗4-5次。用解剖刀去除鳞片，切取裸芽接种于诱导培养基上；所述诱导培养基成分为1/2MS+6-BA 1.0mg/L+IBA0.2mg/L+GA 2.0mg/L+30g/L蔗糖+6g/L琼脂，培养基pH值为5.8-6.0。

3.根据权利要求1所述的一种梨茎尖组织培养快速繁殖方法，其特征在于3）继代培养：采用继代培养基进行丛生芽继代培养，每30-40d继代增殖1次；培养条件为：光照强度1500-2000lx，光照16h/d，温度25-28℃；所述丛生芽继代培养基为1/2MS+6-BA 1.5mg/L+IBA 0.2mg/L+30g/L蔗糖+6g/L琼脂，培养基pH值为5.8-6.0。

4.根据权利要求1所述的一种梨茎尖组织培养快速繁殖方法，其特征在于4）生根培养：切取1-1.5cm生长健壮的新梢转接到生根培养基上，暗处理5d后再转光下培养，培养50-60d得到生根苗；培养条件为：光照强度1500-2000lx，光照16h/d，温度25-28℃；所述生根培养基为1/2MS+IBA 0.6mg/L+60g/L蔗糖+6g/L琼脂，培养基PH值为5.8-6.0。