[发明专利]杠板归药材指纹图谱的建立方法及其标准指纹图谱

权利要求书

1.一种杠板归药材指纹图谱的建立方法，其特征在于：包括以下步骤：

（1）供试品溶液的制备：取杠板归药材粉碎，过筛，称取样品，用乙醇加热回流提取1～4次，每次0.5-3小时，然后浓缩，用甲醇定容，过滤，滤液作为供试品溶液；

（2）对照品溶液的制备：取适量槲皮素、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖醛酸对照品，分别加入甲醇制成对照品溶液；

（3）测定：分别精密吸取供试品溶液和对照品溶液，用高效液相色谱仪测定；将杠板归供试品溶液注入高效液相色谱仪，以0.05%H₃PO₄水溶液为A相、乙腈为B相进行梯度洗脱，洗脱液进入DAD紫外检测器，检测器采集85min的检测数据；

（4）以对照品色谱峰的相对保留时间和峰面积为1，计算供试品色谱峰的相对保留时间和峰面积，用指纹图谱软件对所得的数据和图谱进行处理，即得到杠板归药材标准指纹图谱。

2.根据权利要求1所述杠板归药材指纹图谱的建立方法，其特征在于：高效液相色谱测定时的色谱条件为：色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填料；流动相为B相乙腈和A相0.05%H₃PO₄水溶液；检测波长340nm；流速1mL/min。

3.根据权利要求1所述杠板归药材指纹图谱的建立方法，其特征在于：供试品溶液的制备过程为：取杠板归药材粉碎过40目筛，准确称取样品1克，加入70%乙醇溶液80mL，置于80℃水浴中，加热回流提取1次、3h，然后浓缩至干，用甲醇定容至25mL，过滤，即得供试品溶液。

4.根据权利要求1所述杠板归药材指纹图谱的建立方法，其特征在于：对照品溶液的制备为：取槲皮素、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖醛酸两种对照品，分别加入甲醇，制成每1ml分别含10μg槲皮素、10μg槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖醛酸的两种对照品溶液。

5.根据权利要求1所述杠板归药材指纹图谱的建立方法，其特征在于：步骤（3）中分别精密吸取供试品溶液和对照品溶液各20μL。

6.根据权利要求1所述杠板归药材指纹图谱的建立方法，其特征在于：流动相梯度洗脱过程中，洗脱液的A、B相变化为：0～10min，B相10%～15%；10～40min，B相15%～25%；40～55min，B相25%～35%；55～75min，B相35%～50%；75～76min，B相50%～90%；76～85min，B相90%。

7.如权利要求1所述杠板归药材指纹图谱的建立方法得到的杠板归药材标准指纹图谱。

8.根据权利要求7所述的杠板归药材标准指纹图谱，其特征在于：所述图谱中的共用峰不得少于15个。