[发明专利]一种从HE染色片提取残微核酸的方法有效

专利信息
申请号: 201210157961.4 申请日: 2012-05-21
公开(公告)号: CN102680295A 公开(公告)日: 2012-09-19
发明(设计)人: 赖仁胜;谢玲;陈劼;吴晓斌;徐慧;李惠;孙怡;郑燕影;赵苏苏;赵明 申请(专利权)人: 江苏省中医院;南京紫霄科技有限公司;赖仁胜
主分类号: G01N1/28 分类号: G01N1/28
代理公司: 南京苏高专利商标事务所(普通合伙) 32204 代理人: 邱兴天
地址: 210000 江苏省南京市*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 一种 he 染色 提取 核酸 方法
【权利要求书】:

1.一种从HE染色片提取残微核酸的方法,其特征在于:先用低浓度盐酸乙醇作脱色剂对HE染色片进行脱色,然后用草酸水溶液漂白,再富集靶细胞,最后对富集的靶细胞进行核酸提取即可。

2.根据权利要求1所述的从HE染色片提取残微核酸的方法,其特征在于,具体步骤包括:

(1)将HE染色片浸入二甲苯30min及以上,轻滑掉盖玻片并取出,继续浸泡HE染色片8~12h,更换入新二甲苯,充分祛除中性树胶,得细胞片;更换入新二甲苯,浸泡15~20min;

(2)取出细胞片用无水乙醇浸泡10~20min,充分祛除二甲苯;更换入新无水乙醇,浸泡15min,然后依次进行95%乙醇浸泡10min;80%乙醇浸泡5min;70%乙醇浸泡2min;自来水洗2min;

(3)用1%盐酸酒精苏木素脱色细胞片30min以上;

(4)2%草酸水溶液浸泡细胞片3~10min;自来水稍洗,蒸馏水洗30min,富集细胞片上的靶细胞,并立即转到离心管内;

(5)提取靶细胞核酸即可。

3.根据权利要求1或2所述的从HE染色片提取残微核酸的方法,其特征在于:操作全过程中,禁止细胞片裸露在空气中。

4.根据权利要求1所述的从HE染色片提取残微核酸的方法,其特征在于:所述的HE染色片为:从手术病理石蜡包埋组织、穿刺组织、胃肠镜活检以及细胞涂片中通过正常病理步骤切片、染色得到的HE染色片。

5.根据权利要求1所述的从HE染色片提取残微核酸的方法,其特征在于:所述的核酸包括DNA、RNA和miRNA。

6.根据权利要求1所述的从HE染色片提取残微核酸的方法,其特征在于:步骤(5)中,采用常规方法或采用常规试剂盒进行核酸提取。

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