[发明专利]鹿皮胶中所含生物活性成分的特异性鉴定方法

权利要求书

1.一种鹿皮胶中所含生物活性成分的特异性鉴定方法，其特征在于：包括对鹿皮胶中所含特异鹿胶原蛋白的酶联免疫吸附试验；采用茚三酮柱后衍生法对鹿皮胶中所含特异氨基酸组成分析鉴定；和对鹿皮胶中所含鹿皮胶特异DNA序列的PCR扩增实验鉴定。

2.根据权利要求1所述的鹿皮胶中所含生物活性成分的特异性鉴定方法，其特征在于：所述对鹿皮胶中所含特异鹿胶原蛋白的酶联免疫吸附试验，使用特异鹿胶原蛋白的抗体免疫球蛋白作为包被抗体，采用过氧化物酶标记特异鹿胶原蛋白抗体免疫球蛋白。

3.根据权利要求2所述的鹿皮胶中所含生物活性成分的特异性鉴定方法，其特征在于：所述对鹿皮胶中所含特异鹿胶原蛋白的酶联免疫吸附试验，包括以下步骤：

用特异鹿胶原蛋白的抗体免疫球蛋白包被聚丙烯反应板，并在包被完成后洗去所述特异鹿胶原蛋白的抗体免疫球蛋白包被液；将待测样品与包被于聚丙烯反应板上的特异鹿胶原蛋白的抗体免疫球蛋白进行抗原-抗体反应，且在上述抗原-抗体反应结束后洗去所述待测样品；采用过氧化物酶标记所述特异鹿胶原蛋白抗体免疫球蛋白形成过氧化物酶标记的特异鹿胶原蛋白抗体免疫球蛋白；将上述氧化物酶标记的特异鹿胶原蛋白抗体免疫球蛋白添加到上述聚丙烯反应板上，形成特异鹿胶原蛋白抗体免疫球蛋白-特异鹿胶原蛋白-过氧化物酶标记的特异鹿胶原蛋白抗体免疫球蛋白的复合物；采用邻苯二胺底物进行显色；若显色成功则表明待测样品中含有特异鹿胶原蛋白，采用酶标比色仪测定显色物的吸光值定量样品中特异鹿胶原蛋白的含量。

4.根据权利要求1所述的鹿皮胶所含生物活性成分的特异性鉴定方法，其特征在于：所述对鹿皮胶中所含鹿皮胶特异DNA序列的PCR扩增实验鉴定，包括以下步骤：

按传统DNA纯化提取方法将鹿皮胶中的基因组DNA进行纯化提取，得经纯化的鹿皮胶基因组DNA提取物；利用引物对CAGCTAGCTATAGTCT/GTATGGATAATGCAGTT对所得鹿皮胶基因组DNA提取物进行PCR扩增试验进行扩增，得扩增产物一；利用引物对CGTGGACTACGATGCTT/TAGTCC TTGGCTACGT对所得鹿皮胶基因组DNA提取物进行PCR扩增试验进行扩增，得扩增产物二；将所得扩增产物一和二分别进行琼脂糖凝胶电泳检测，根据扩增产物片段大小判定鹿皮胶的真伪。