[发明专利]一种构建组织工程血管的方法

权利要求书

1.一种血管脱细胞基质膜片的制备方法，其特征在于，所述的方法是沿血管纵轴剪开血管，剔除外膜及刮除内皮层，切成长方形血管块，沿血管块所在平面切成长方形薄片，脱细胞后冻干。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述的血管取自成年猪主动脉弓及升主动脉。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述的长方形血管块长15mm，宽10mm。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述的长方形薄片的厚度是20μm。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述的脱细胞是采用质量分数1%的SDS溶液脱细胞。

6.一种构建组织工程血管的方法，其特征在于，它包括下列步骤：

a）按照权利要求1所述的方法制备血管脱细胞基质膜片；

b）培养血管平滑肌细胞；

c）三明治法构建组织工程血管：胰蛋白酶消化步骤b）获得的平滑肌细胞，将步骤a）的血管脱细胞基质膜片和消化后的平滑肌细胞按照“膜片－细胞悬液－膜片－细胞悬液”的方式在硅胶管上层层叠加，置入含低糖DMEM和FBS的培养液中培养。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述的平滑肌细胞是人平滑肌细胞。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述的硅胶管外直径为6mm，所述的细胞悬液每滴加5μl则所述的膜片环绕叠加20层。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述的组织工程血管是在含5% CO₂ 的37℃培养箱中培养，隔两天半量换液，培养1周。