[发明专利]新的安丝菌素类化合物及其制备方法

权利要求书

1.式（I）代表的新的安丝菌素类化合物，

其中，R为CH₂CH₃或CH₂CH(CH₃)₂。

2.一种如权利要求1所述的新的安丝菌素类化合物的制备方法，其特征在于：其操作步骤如下：

步骤一：制备束丝放线菌菌株FIM06-0063（Actinosynnema sp）发酵液；

步骤二：将步骤一所获得的束丝放线菌菌株FIM06-0063发酵液进行大孔树脂吸附柱层析，得到粗提物；

步骤三：将步骤二所获得的粗提物进行正相硅胶柱层析，并采用氯仿-甲醇梯度洗脱粗提物，然后分段收集各洗脱液；

步骤四：将步骤三所获得的各洗脱液分别进行薄层层析，并采用高效液相色谱对各洗脱液分别进行检测分析，然后将薄层层析结果显橙红色、且高效液相色谱检测结果具有相同峰的洗脱液合并，并减压浓缩该合并后的洗脱液得到第一浓缩物；

步骤五：将步骤四所获得的第一浓缩物进行中压反相硅胶柱层析以获得粗产物，进行中压反相硅胶柱层析时，先采用体积分数为10%甲醇水溶液为流动相平衡10分钟后，然后流动相采用体积比10%~100%：1的甲醇-水溶剂系统梯度洗脱90min，流动相的流速为5ml/min；

步骤六：将步骤五所获得的粗产物进行Sephadex LH-20凝胶柱层析，所述Sephadex LH-20凝胶柱层析采用体积比1:1的氯仿-甲醇溶剂系统洗脱，并 根据流分与碘化铋钾显色反应分段收集各流分，然后将与碘化铋钾反应显色相同的流分合并，减压浓缩以获得第二浓缩物；

步骤七：将步骤六所获得的第二浓缩物采用制备型高效液相色谱进行分离，得到3个组分；最后，将3个组分分别经过制备型硅胶板分离以获得安丝菌素类化合物；所述制备型高效液相色谱的分离条件为：流动相为70%的甲醇水溶液，流动相的流速为1.5ml/min，检测波长为254nm。

3.如权利要求2所述的新的安丝菌素类化合物的制备方法，其特征在于：所述束丝放线菌菌株FIM06-0063的分离方法如下：

步骤100：取云南美登木的老叶和叶柄，用自来水冲洗30min后，再用蒸馏水洗净置于无菌培养皿中；接着将所述老叶和叶柄依次用75%酒精擦洗，无菌水冲洗后，转入质量分数为0.1%的氯化汞溶液中浸泡3min，再用无菌水冲洗5次，除去消毒液；然后将所述老叶和叶柄剪成小片或小段，放入无菌的研钵中捣碎成糊状物；

步骤200：用无菌的玻璃涂布棒沾取少量步骤100中得到的糊状物直接涂布于淀粉天冬素琼脂平板，然后将平板置于28℃下培养7～20天，得到放线菌单菌落；所述淀粉天冬素琼脂的组分：可溶性淀粉2%，L-天冬素0.05%，KNO₃ 0.1%，K₂HPO₄·3H₂O 0.05%，NaCl 0.05%，MgSO₄·7H₂O 0.05%，CaCO₃0.05%，琼脂1.5%，蒸馏水配制，pH为7.5，且该淀粉天冬素琼脂组分中的百分数均为质量分数；

步骤300：将经过步骤200处理获得的放线菌单菌落转接于无机盐淀粉琼脂斜面，获得束丝放线菌菌株FIM06-0063的斜面培养物；所述无机盐淀粉琼脂斜面的组分为：可溶性淀粉10g；K₂HPO₄·3H₂O 1g；MgSO₄·7H₂O 1g；NaCl 1g；(NH₄)₂SO₄ 2g；CaCO₃ 2g；FeSO₄·7H₂O 0.001g；MnCl₂·4H₂O 0.001g；ZnSO₄·7H₂O 0.001g；琼脂20g；蒸馏水1000mL，pH为7.0～7.4。