[发明专利]八角基因组DNA的提取方法

权利要求书

1.一种八角基因组DNA的提取方法，其特征在于经过下列各步骤：

（1）按每100 g八角粉末加入6～8 L提取液的量，在八角粉末中加入预热55～65 ℃的CTAB提取液，混匀，在55～65 ℃下保温30～60分钟，其间晃动3～4次，使其充分混合，得混合物；

（2）将步骤（1）的混合物在转速为8000～12000 rpm下，离心5～10分钟，得到上清液A；

（3）在步骤（2）所得上清液A中加入等体积的氯仿与异戊醇溶液，其中，氯仿︰异戊醇的体积比为24︰1，混匀后在室温下静置5～10分钟，再在8000～12000 rpm下离心分离5～10分钟，取出上清液；在上清液中再次加入等体积的体积比为24︰1的氯仿与异戊醇溶液，混匀后室温静置5～10分钟，离心分离，得到上清液B；

（4）按上清液B体积的2～3倍的量，在上清液B中加入-30 ℃的无水乙醇，产生絮状沉淀，离心得沉淀物；

（5）采用植物DNA提取试剂盒的吸附柱将步骤（4）所得沉淀物，按试剂盒操作程序进行漂洗、室温静置、离心洗脱，得洗脱液；

（6）将步骤（5）所得的洗脱液返回到吸附柱中，室温下静置5～10分钟，再在8000～12000 rpm下离心2分钟，所得的液体即为八角基因组DNA溶液。

2.根据权利要求1所述的八角基因组DNA的提取方法，其特征在于：所述步骤（1）的CTAB提取液为：母液是含有1.4 mol/L的NaCI、100 mmol/L的Tris-HCI、20 mmol/L的EDTA的混合溶液，母液的pH为8.0，常规灭菌；使用时在每100ml母液中加入3g的CTAB，2g的PVP和2ml的β-巯基乙醇。