[发明专利]一种采用固定化菌株高效生产L-山梨糖的方法

权利要求书

1.一种采用固定化菌株高效生产L-山梨糖的方法，其特征在于以固定化葡萄糖酸杆菌(Gluconobacter oxydans)ATCC 9937为发酵种子，以油酸为氧载体，30°C、200rpm条件下转化生产L-山梨糖。

2.权利要求1所述的方法，其特征在于所述固定化采用海藻酸钠为载体，固定化细胞直径为2mm。

3.权利要求2所述的方法，其特征在于具体步骤为接种发酵种子到增殖培养基中，500mL摇瓶装液50mL，于30°C、200rpm条件下培养20-24h；再将发酵培养基转入完成增殖培养的固定化种子中，同时加入油酸，30°C、200rpm条件下每批培养42h，固定化细胞可重复使用6次以上。

4.权利要求3所述的方法，其特征在于所述油酸的添加浓度为4%(v/v)。

5.根据权利要求书1所述的方法，其特征在于所述固定化的方法为：将1-2环斜面种子接入装有50mL液体种子培养基的500mL摇瓶中，于30°C、200rpm条件下培养20-24h，按1比3的比例与2％的海藻酸钠溶液混合均匀，用电子蠕动泵缓慢泵入100mL1.5%的CaCl₂溶液中，形成直径为2mm-3mm的固定化细胞颗粒，4°C静置2h，使颗粒稳定成型，再用无菌水洗涤2次，即得固定化细胞。

6.跟据权利要求书3所述的方法，其特征在于增殖培养基组成为：山梨醇150g，酵母膏6g，CaCO₃ 2g，pH4.8-5.1，自来水定容至1L。

7.跟据权利要求书3所述的方法，其特征在于发酵培养基组成为：山梨醇150g，酵母膏2g，CaCO₃ 2g，pH4.8-5.1，自来水定容至1L。