[发明专利]一种从野生小叶樟牧草里提取叶绿素铜钠盐的方法

说明书

技术领域：

本发明属于天然有机化学领域，涉及一种从野生小叶樟牧草里提取叶绿素转化成叶绿素铜钠盐的方法，特别是涉及一种利用两步法萃取叶绿素和草蛋白，糊状叶绿素经碱液皂化，铜置换成叶绿素铜钠盐的新方法。

背景技术：

大兴安岭小叶樟草，也称苫房草，是细茎多叶的速生草类，一般野生生长，在林区、由地的沟塘、低洼地处生长，非常茂盛，有的地方成片生长，似种植的麦田一样，产量很高。据测定，小叶樟含粗蛋白10％～16％、粗脂肪1％～2％、无氮浸出物30％以上，是奶牛的好饲料。小叶樟叶绿素不溶于水，溶于有机溶剂，可用多种有机溶剂，如丙酮、乙醇或二甲基亚砜等提取。国内提取叶绿素铜钠盐多用蚕粪、竹叶、芭蕉叶作原料，而以大兴安岭新鲜野生牧草小叶樟草作原料的未见报道。因此，本发明的意义不仅在于综合利用当地野生资源，开发食用色素新品种，而且也对充分利用类似的林下资源提供了参考依据。

发明内容：

本发明采用两步法萃取叶绿素，草叶研磨提取，滤渣浸泡提取，得草蛋白和糊状叶绿素，再经碱液皂化，萃取后酸化置铜、纯化成叶绿素铜钠盐。本发明所用原料系大兴安岭野生，无需提心原料供应问题

发明优点如下：

1、本发明采用两步法萃取叶绿素，叶绿素有效成分提取率高。

2、采用大兴安岭野生牧草小叶樟作原料，综合利用当地野生资源，能得到草蛋白和叶绿素铜钠盐两种物质。

3、本发明方法简单易操作，工艺简单，适合人生产，投资少，生产成本低。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案是：一种利用两步法萃取叶绿素和草蛋白，糊状叶绿素经碱液皂化，铜置换成叶绿素铜钠盐的新方法。其步骤如下：

(1)叶绿素初提：

新鲜小叶樟草切断3-5cm，6-8倍80-90％乙醇液提取，加入研钵研磨成匀浆，静置，过滤得滤液，用乙醇冲洗研钵，滤液合并；

(2)滤渣二次提取：

将滤渣经过压榨机，得剩余鲜汁，过滤，将所有滤液合并后加入汽油，充分搅拌，分别置于分液漏斗中，充分静置2-3h以上，液体分为三层。

(3)得初提物

上层为油层，呈墨绿色，下层为黄色液体称水层，中层悬浮于水层之上，上层之下，称灰白沉淀层。将水层、灰白沉淀层、油层分别过滤，滤渣合并，用蒸馏水洗涤抽干，于90-100℃烘干得到草蛋白；将油层减压回收乙醇及汽油，得糊状叶绿素；

(4)皂化：用4体积的叶练素酒精液加1体积的5％-10％的氢氧化钠溶液进行皂化，温度50-60℃，皂化1h，静置分层，下层为水容性叶绿素皂化液；

(5)萃取：

将叶绿素皂化液用石油醚萃取脂溶性杂质，萃取二次，每次加入等量石油醚丁酒精皂化液中，搅拌静置分层，放出石油醚层，得萃取液；

(6)置铜

萃取液调节PH值至微酸性，加入20％的硫酸铜水溶液，再调节至PH值2-3，60℃下保持30-60min，充分置铜。

(7)纯化：

过滤，用90％乙醇洗涤1-2次，洗涤液与滤液合并，加一倍水稀释，叶绿素铜酸即可析出，烘干得固体叶绿铜酸，用40-50％的稀乙醇溶液洗涤几次，滤干即可纯化。

(8)成盐；

加入5％氢氧化钠溶液，溶解铜酸，一直加到PH为11为止，成盐过程先早粘稠状，随氢氧化钠加入，渐渐变稀，，直到PH 11时，又复变稠。成盐后过滤，滤渣用蒸馏水冲洗1-2次，洗涤液合并于滤液中，在60-80℃真空脱水得成品。

具体实施方式：

实施例1：一种利用两步法萃取叶绿素和草蛋白，糊状叶绿素经碱液皂化，铜置换成叶绿素铜钠盐的新方法。其步骤如下；

(1)新鲜小叶樟草1000g切断3cm，6倍80％乙醇液提取，加入研钵研磨成匀浆，静置，过滤得滤液，用乙醇冲洗研钵；

(2)将滤渣经过压榨机，得剩余鲜汁，过滤，将所有滤液合并后加入汽油，充分搅拌，分别置于分液漏斗中，充分静置2h以上，液体分为三层。

(3)上层为油层，呈墨绿色，下层为黄色液体称水层，中层悬浮于水层之上，上层之下，称灰白沉淀层。将水层、灰白沉淀层、油层分别过滤，滤渣合并，用蒸镏水洗涤抽干，于90℃烘干得到草蛋白82g；将油层减压回收乙醇及汽油，得糊状叶绿素5.89g；

(4)用4体积的叶绿素酒精液加1体积的8％的氢氧化钠溶液进行皂化，温度55℃，皂化1h，静置分层，下层为水溶性叶绿素皂化液；