[发明专利]一种从野生小叶樟牧草里提取叶绿素铜钠盐的方法

权利要求书

1.一种利用两步法萃取叶绿素和草蛋白，糊状叶绿素经碱液皂化，铜置换成叶绿素铜钠盐的新方法，其步骤如下：

(1)叶绿素初提：新鲜小叶樟草切断3-5cm，6-8倍80-90％乙醇液提取，加入研钵研磨成匀浆，静置，过滤得滤液，用乙醇冲洗研钵，滤液合并；

(2)滤渣二次提取：将滤渣经过压榨机，得剩余鲜汁，过滤，将所有滤液合并后加入汽油，充分搅拌，分别置于分液漏斗中，充分静置2-3h，液体分为二层。

(3)得初提物：上层为油层，呈墨绿色，下层为黄色液体称水层，中层悬浮于水层之上，上层之下，称灰白沉淀层。将水层、灰白沉淀层、油层分别过滤，滤渣合并，用蒸馏水洗涤抽干，于90-100℃烘干得到草蛋白；将油层减压回收乙醇及汽油，得糊状叶绿素；

(4)皂化：用4体积的叶绿素酒精液加工体积的5％-10％的氢氧化钠溶液进行皂化，温度50-60℃，皂化1h，静置分层，下层为水溶性叶绿素皂化液；

(5)萃取：将叶绿素皂化液用石油醚萃取脂溶性杂质，萃取三次，每次加入等量石油醚于酒精皂化液中，搅拌静置分层，放出石油醚层，得萃取液；

(6)置铜：萃取液调节PH值至微酸性，加入20％的硫酸铜水溶液，再调节至PH值2-3，60℃下保持30-60min，充分置铜。

(7)纯化：过滤，用90％乙醇洗涤1-2次，洗涤液与滤液合并，加 倍水稀释，叶绿素铜酸即可析出，烘干得固体叶绿铜酸，用40-50％的稀乙醇溶液洗涤几次，滤干即可纯化。

(8)成盐：加入5％氢氧化钠溶液，溶解铜酸，一直加到PH为11为止，成盐过程先呈粘稠状，随氢氧化钠加入，渐渐变稀，，直到PH 11时，又复变稠。成盐后过滤，滤渣用蒸馏水冲洗1-2次，洗涤液合并于滤液中，在60-80℃真空脱水得成品。

2.根据权利要求1所述的利用两步法萃取叶绿素和草蛋白，糊状叶绿素经碱液皂化，铜置换成叶绿素铜钠盐的新方法，其特征是：在所属的步骤(1)中，新鲜小叶樟草切断3-5cm，提取溶剂为80-90％乙醇液，料液比6-8倍。

3.根据权利要求2所述利用两步法萃取叶绿素和草蛋白，糊状叶绿素经碱液皂化，铜置换成叶绿素铜钠盐的新方法。其特征是：在所属的步骤(2)中，提取溶剂为汽油，时间2-3h

4.根据权利要求3所述的利用两步法萃取叶绿素和草蛋白，糊状叶绿素经碱液皂化，铜置换成叶绿素铜钠盐的新方法。其特征是：在所属的步骤(3)中，得到糊状叶绿素和草蛋白，其中草蛋白的烘干温度90-100℃。

5.根据权利要求4所述的利用两步法萃取叶绿素和草蛋白，糊状叶绿素经碱液皂化，铜置换成叶绿素铜钠盐的新方法。其特征是：在所属的步骤(4)中，用5％-10％的氢氧化钠溶液进行皂化，皂化温度50-60℃，时间1h，叶绿素酒精液与氢氧化钠液体积比为4∶1。

6.根据权利要求5所述的利用两步法萃取叶绿素和草蛋白，糊状叶绿素经碱液皂化，铜置换成叶绿素铜钠盐的新方法。其特征是：在所属的步骤(6)中，置铜采取20％的硫酸铜水溶液，PH值2-3，60℃下保持30-60 min。

7.根据权利要求6 所述的利用两步法萃取叶绿素和草蛋白，糊状叶绿素经碱液皂化，铜置换成叶绿素铜钠盐的新方法。其特征是：在所属的步骤(7)中，析出叶绿素铜酸前，用乙醇作为洗涤液，浓度90％，洗涤1-2次，纯化前用40-506稀乙醇溶液洗涤。

8.根据权利要求7所述的利用两步法萃取叶绿素和草蛋白，糊状叶绿素经碱液皂化，铜置换成叶绿素铜钠盐的新方法。其特征是：在所属的步骤(8)中，溶解铜酸用5％氢氧化钠溶液，成盐PH值调至11，真空脱水温度60-80℃。