[发明专利]一种负载季铵化壳聚糖/siRNA复合粒子的皮肤再生材料及其制备方法

权利要求书

1.一种负载季铵化壳聚糖/siRNA复合粒子的皮肤再生材料，其特征是包括由胶原-壳聚糖三维多孔支架和硅橡胶薄膜构成的胶原-壳聚糖/硅橡胶双层支架，在双层支架中吸附有季铵化壳聚糖/siRNA复合粒子，其中，siRNA与胶原-壳聚糖/硅橡胶双层支架的质量比为1：1000—10：1000，季铵化壳聚糖/siRNA复合粒子中季铵化壳聚糖与siRNA的质量比为1:1—50:1。

2.根据权利要求1所述的负载季铵化壳聚糖/siRNA复合粒子的皮肤再生材料，其特征是所说的siRNA是抑制转化生长因子β1的siRNA、抑制Smad2蛋白的siRNA或抑制Smad3蛋白的siRNA。

3.制备权利要求书1所述的负载季铵化壳聚糖/siRNA复合粒子的皮肤再生材料的方法，其特征在于包括以下步骤：

1）用超纯水分别配制浓度为1—5mg/mL的季铵化壳聚糖溶液和浓度为0.1—1mg/mL的siRNA溶液；将季铵化壳聚糖溶液和siRNA溶液等体积混合，涡旋振荡均匀后静置，制得季铵化壳聚糖/siRNA复合粒子；

2）用质量浓度为0.5%—3%的乙酸溶液分别配制质量浓度为0.1%—0.7%的胶原溶液和质量浓度为0.1%—0.7%的壳聚糖溶液；将壳聚糖溶液滴入胶原溶液中使得壳聚糖和胶原的质量比为1:9—5:5，搅拌均匀及真空脱泡，得到胶原-壳聚糖混合溶液；将胶原-壳聚糖混合溶液注入模具中，在-10 ^oC—-80 ^oC温度下冷冻并冻干，获得胶原-壳聚糖三维多孔支架；将胶原-壳聚糖三维多孔支架在质量浓度为0.01%—1%的戊二醛溶液中交联1—48小时，反复清洗后，再次-10 ^oC—-80 ^oC温度下冷冻并冻干；

3）将医用胶黏剂以0.05—0.5mg/cm²的量均匀涂覆在厚度为0.05—0.2mm的硅橡胶薄膜表面，然后将步骤2）制备好的胶原-壳聚糖三维多孔支架黏贴于涂覆胶黏剂的硅橡胶薄膜表面上，获得胶原-壳聚糖/硅橡胶双层支架；

4）将步骤1）的季铵化壳聚糖/siRNA复合粒子滴加到胶原-壳聚糖/硅橡胶双层支架上，其中siRNA与胶原-壳聚糖/硅橡胶双层支架的质量比为1:1000—10:1000；室温下孵化1—4小时，在-10 ^oC—-80 ^oC温度下冷冻并冻干，得到负载季铵化壳聚糖/siRNA复合粒子的皮肤再生材料。

4.根据权利要求3所述的负载季铵化壳聚糖/siRNA复合粒子的皮肤再生材料的制备方法，其特征是所说的医用胶黏剂是α-氰基丙烯酸酯类胶黏剂或有机硅胶黏剂。

5.根据权利要求3所述的负载季铵化壳聚糖/siRNA复合粒子的皮肤再生材料的制备方法，其特征是所说的siRNA是抑制转化生长因子β1的siRNA、抑制Smad2蛋白的siRNA或抑制Smad3蛋白的siRNA。