[发明专利]一种生产重组粉尘螨变应原Der f1和Der f2融合蛋白的方法无效
申请号: | 201210139240.0 | 申请日: | 2012-05-08 |
公开(公告)号: | CN102676568A | 公开(公告)日: | 2012-09-19 |
发明(设计)人: | 崔玉宝;蔡红星;杨庆贵;王运刚 | 申请(专利权)人: | 崔玉宝;蔡红星;杨庆贵;王运刚 |
主分类号: | C12N15/70 | 分类号: | C12N15/70;C12R1/19 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 224056 江苏省盐*** | 国省代码: | 江苏;32 |
权利要求书: | 查看更多 | 说明书: | 查看更多 |
摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 生产 重组 粉尘 螨变应原 der f1 f2 融合 蛋白 方法 | ||
1.一种生产重组粉尘螨变应原Der f1和Der f2融合蛋白的方法,其特征在于它通过提取粉尘螨总RNA,根据GenBank公布的粉尘螨变应原第1组份(Der f1)和粉尘螨变应原第2组份(Der f2)核酸序列设计引物,用PCR扩增获得其编码基因,依次克隆至pMD19-T载体、亚克隆至表达载体pET-28a(+)并转化至大肠杆菌并用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,以PMD19-T-Der f1、PMD19-T-Der f2为模板,PCR扩增后切胶、回收产物Der f1和Der f2,PCR搭链构建嵌合基因片段,切胶回收产物并命名为Der fm,克隆至pMD19-T载体、亚克隆至表达载体pET-28a(+)并转化至大肠杆菌并用IPTG诱导表达。所有表达产物经琼脂糖凝胶FF亲和柱层析纯化后,用SDS-PAGE和Western-blotting验证产物。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息,商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于崔玉宝;蔡红星;杨庆贵;王运刚,未经崔玉宝;蔡红星;杨庆贵;王运刚许可,擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作,请联系【客服】
本文链接:http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201210139240.0/1.html,转载请声明来源钻瓜专利网。