[发明专利]绿豆用于制备ACE抑制剂的应用

说明书

技术领域

本发明属于食品领域，具体地说，是关于绿豆用于制备血管紧张素转化酶（Angiotensin Converting Enzyme，ACE）抑制剂的应用。

背景技术

绿豆（学名：Vigna radiata）是一种豆科、蝶形花亚科豇豆属植物，原产印度、缅甸地区。现在东亚各国普遍种植，非洲、欧洲、美国也有少量种植，中国、缅甸等国是主要的绿豆出口国。种子和茎被广泛食用。

绿豆是一种高蛋白、中淀粉、低脂肪的药食同源作物，每100g干物质含有22~26g蛋白质，是禾谷类的2倍，含淀粉50g左右，膳食纤维6.4g左右，脂肪含量低，仅占1%。此外，绿豆中还含有丰富的维生素及微量元素，维生素B1是鸡肉的17.5倍，维生素B2是禾谷类的2~4倍，磷是禾谷类及猪肉、鸡肉、鱼、鸡蛋的2倍，钙是禾谷类的4倍，还含有铁、硒、镁、锌等微量元素。绿豆营养成分全面，不仅蛋白质含量高，而且蛋白质功效比高，居各种豆类之首，蛋白质中氨基酸种类齐全且构成比例较好，尤其以赖氨酸含量较为丰富。

ACE（血管紧张素转化酶，Angiotensin Converting Enzyme）在人体内的作用是将血管紧张素I（Angiotensin I Converting Enzyme）转化成血管紧张素II（Angiotensin II Converting Enzyme），而血管紧张素II为强烈的血管收缩物质，可使血管收缩，从而使体内血压升高。此外，ACE还可以失活体内调节血压的舒缓激肽，也从而使体内血压升高。

ACE是一种金属肽酶，含有2个结合Zn²⁺的位点，即所谓“必须结合位点（Obligatory Binding Site）”。Zn²⁺结合位点是ACE催化反应的活性基团所在部位。各种ACE抑制物的共同作用是与ACE活性部位的Zn²⁺结合，使之失活。

降血压肽是由数个氨基酸组成的肽，是对ACE活性区域亲和力较强的竞争性抑制剂，它们与ACE的亲和力比血管紧张素转化酶I（AngI）或舒缓激肽更强，而且也较不容易从ACE结合区释放，降低ACE活性或使其失去活性，从而阻碍ACE催化血管紧张素Ⅰ转化成血管紧张素II，使血管不收缩，以及催化水解舒缓激肽成为失活片段的两种生化反应过程，起到降血压的作用。

到目前为止，未发现有关于利用绿豆制备ACE抑制物或降血压药物的报道。

发明内容

本申请的发明人在长期研究绿豆的用途的过程中发现，绿豆的水解产物具有明显的血管紧张素转化酶（ACE）抑制活性。

因此，本发明的目的在于提供一种绿豆用于制备血管紧张素转化酶抑制剂的应用。

根据本发明，所述绿豆为绿豆经蛋白酶水解后的产物。

根据本发明的优选实施例，所述蛋白酶选自：胃蛋白酶，胰蛋白酶，或者它们的组合。

基于绿豆具有抑制血管紧张素转化酶活性的作用，绿豆可进一步用于开发具有降血压功能的食品或保健品。

本发明为绿豆的开发利用开辟了一条全新的途径，具有非常广泛的应用前景。

具体实施方式

以下结合具体实施例，对本发明的降血压多肽的制备方法作进一步详细说明。应理解，以下实施例仅用于实施本发明而非用于限定本发明的范围。

以下实施例中，ACE抑制活性的测定原理及方法步骤如下：

绿豆的蛋白水解物（多肽）的ACE抑制活性测定采用体外模拟测定，体外ACE抑制率测试原理为：底物马尿酰组氨酰亮氨酸（HHL）在ACE酶的催化作用下，可以生产马尿酸（Hip）和二肽，通过液相的方法测定马尿酸的含量，进而可以间接测定ACE酶的酶活；而ACE抑制剂的存在可以抑制ACE酶的活性，致使Hip的生成减少，从而间接反映了ACE抑制肽的活性。

测试ACE抑制率的方法步骤如下：选取EP管作为反应器，编号0、1、2、3等。0号管加入15μL去离子水为对照，1、2、3等管加入15μL的ACE抑制剂。然后各管内均加入15μL的底物HHL，37℃温浴5min后，加入5μL的ACE酶启动反应，在37℃水浴中反应40min。反应结束后，加入300μL 1M HCl终止反应。反应液进行高速离心，过4.5μm的滤头，然后进行高效液相色谱（HPLC）测定。HPLC条件是：10%乙腈：90%水（0.1%TFA），检测波长228nm，柱温30℃，上样量20μL；

ACE抑制率（X）按下式计算：

X=(A对照-A1)/A对照×100%