[发明专利]一种气泡上升法检测纤溶酶效价的方法

权利要求书

1.一种气泡上升法检测纤溶酶效价的方法，其特征在于，所述方法为：

一、配制供试品溶液：取供试品纤溶酶适量，然后加入pH6-9的三羟甲基氨基甲烷缓冲溶液，根据供试品效价估计值将所述供试品纤溶酶稀释为每1毫升中含10-10000单位的溶液；

二、配制纤溶酶标准品溶液：取纤溶酶标准品适量，加入pH6-9的三羟甲基氨基甲烷缓冲溶液稀释成每1毫升中含10-10000单位的至少两种不同浓度的标准品溶液；

三、测定方法：取若干试管，各精密加入1-10毫克/毫升的纤维蛋白原溶液0.1-1.0毫升，将各试管置于37±0.5摄氏度水浴中保温2-4分钟，然后在各试管中加入1-10BP单位/毫升的凝血酶溶液0.1-1.0毫升，同时精密加入步骤(二)所得标准品溶液或步骤(一)所得供试品溶液0.1-1.0毫升，立即摇匀并计时，各试管中的反应物质在10秒内凝结，当凝块内的小气泡上升到反应系统体积的一半时，立即分别记时，然后以纤溶酶标准品浓度的对数为横坐标，以反应终点时间的对数为纵坐标，进行线性回归并绘出线性回归曲线，根据线性回归曲线求得所述供试品溶液的效价。

2.根据权利要求1所述的气泡上升法检测纤溶酶效价的方法，其特征在于：

所述步骤(三)为：取试管若干支，各精密加入2.5mg/ml的纤维蛋白原溶液0.5ml，置37℃±0.5℃水浴中保温约3分钟，加入2.5BP单位/ml的凝血酶溶液0.5ml，同时精密加入步骤(二)所述标准品溶液或步骤(一)所述供试品溶液各0.2ml，立即摇匀并计时。反应系统应在10秒内凝结，当凝块内小气泡上升到反应系统体积一半时作为反应终点，立即记时。每种浓度测3次，3次测定中最大值与最小值的差不得超过平均值的10％，求平均值。以纤溶酶标准品浓度的对数为横坐标，以反应终点时间的对数为纵坐标，进行线性回归，用线性回归方程求得供试品溶液的效价。

3.根据权利要求1所述的气泡上升法检测纤溶酶效价的方法，其特征在于：所述pH6-9的三羟甲基氨基甲烷缓冲溶液配制方法为：取三羟甲基氨基甲烷适量，加水500毫升溶解后，加0.1摩尔/升盐酸溶液适量，混匀，调节pH至6-9，再加水稀释至1000毫升。

4.根据权利要求1所述的气泡上升法检测纤溶酶效价的方法，其特征在于：所述1-10BP单位/毫升的凝血酶溶液的配制方法为：取凝血酶，加入pH6-9三羟甲基氨基甲烷缓冲溶液溶解并稀释成每1毫升中含1-10BP单位的溶液。

5.根据权利要求1所述的气泡上升法检测纤溶酶效价的方法，其特征在于：所述1-10毫克/毫升的纤维蛋白原溶液的配制方法为：取纤维蛋白原，加pH6-9的三羟甲基氨基甲烷缓冲液溶解并稀释成每1毫升中含可凝固蛋白1-10毫克的溶液。