[发明专利]增血压素固相合成工艺及其中间体和应用

权利要求书

1.一种增血压素的制备方法，其特征在于，包含以下步骤：

(a)制备保护增血压素R₁-Asn-Arg(R₂)-Val-Tyr(R₃)-Val-His(R₄)-Pro-Phe-R₅，其中，R₁为氨基保护基，R₂、R₃、R₄为侧链保护基，R₅为羧基树脂；

(b)在切割试剂的作用下，步骤(a)所得的保护增血压素脱保护并和树脂分离，生成增血压素H-Asn-Arg-Val-Tyr-Val-His-Pro-Phe-OH。

2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(b)所述的切割试剂为TFA∶TI S∶H₂O体积比为95∶2.5∶2.5的混合物；R₁、R₂、R₃、R₄、R₅分别为Boc、Pbf、tBu、Trt、Wang树脂。

3.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(a)包括以下步骤：

(1)在挥发性有机溶剂和非挥发性有机溶剂组成的溶剂中，在缩合剂作用下，在助缩合剂的启动下，氨基Fmoc保护的苯丙氨酸和经过挥发性有机溶剂溶胀处理的羧基树脂进行缩合反应，得到连接Fmoc保护苯丙氨酸的树脂，然后将氨基保护基团Fmoc脱除，得到连接苯丙氨酸的树脂；

(2)在挥发性有机溶剂和非挥发性有机溶剂组成的溶剂中，在缩合剂的存在下，在助缩合剂的启动下，步骤(1)所得的连接苯丙氨酸的树脂和氨基Fmoc保护的脯氨酸进行缩合反应，然后进行氨基保护基团Fmoc脱除反应，得到连接脯氨酸、苯丙氨酸的树脂；

(3)在挥发性有机溶剂和非挥发性有机溶剂组成的溶剂中，在缩合剂的存在下，在助缩合剂的启动下，步骤(2)所得的连接脯氨酸、苯丙氨酸的树脂和氨基Fmoc保护侧链Trt保护的组氨酸进行缩合反应，然后进行氨基保护基团Fmoc脱除反应，得到连接侧链Trt保护组氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸的树脂；

(4)在挥发性有机溶剂和非挥发性有机溶剂组成的溶剂中，在缩合剂的存在下，在助缩合剂的启动下，步骤(3)所得的连接侧链Trt保护组氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸的树脂和氨基Fmoc保护的缬氨酸进行缩合反应，然后进行氨基保护基团Fmoc脱除反应，得到连接缬氨酸、侧链Trt保护组氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸的树脂；

(5)在挥发性有机溶剂和非挥发性有机溶剂组成的溶剂中，在缩合剂的存在下，在助缩合剂的启动下，步骤(4)所得的连接缬氨酸、侧链Trt保护组氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸的树脂和氨基Fmoc保护侧链tBu保护的酪氨酸进行缩合反应，然后进行氨基保护基团Fmoc脱除反应，得到连接侧链tBu保护酪氨酸、缬氨酸、侧链Trt保护组氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸的树脂；

(6)在挥发性有机溶剂和非挥发性有机溶剂组成的溶剂中，在缩合剂的存在下，在助缩合剂的启动下，步骤(5)所得的连接侧链tBu保护酪氨酸、缬氨酸、侧链Trt保护组氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸的树脂和氨基Fmoc保护的缬氨酸进行缩合反应，然后进行氨基保护基团Fmoc脱除反应，得到连接缬氨酸、侧链tBu保护酪氨酸、缬氨酸、侧链Trt保护组氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸的树脂；

(7)在挥发性有机溶剂和非挥发性有机溶剂组成的溶剂中，在缩合剂的存在下，在助缩合剂的启动下，步骤(6)所得的连接缬氨酸、侧链tBu保护酪氨酸、缬氨酸、侧链Trt保护组氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸的树脂和氨基Fmoc保护侧链Pbf保护的精氨酸进行缩合反应，然后进行氨基保护基团Fmoc脱除反应，得到连接侧链Pbf保护精氨酸、缬氨酸、侧链tBu保护酪氨酸、缬氨酸、侧链Trt保护组氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸的树脂；

(8)在挥发性有机溶剂和非挥发性有机溶剂组成的溶剂中，在缩合剂的存在下，在助缩合剂的启动下，步骤(7)所得的连接侧链Pbf保护精氨酸、缬氨酸、侧链tBu保护酪氨酸、缬氨酸、侧链Trt保护组氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸的树脂和氨基Boc保护的天冬酰胺进行缩合反应，得到连接氨基Boc保护的天冬酰胺、侧链Pbf保护精氨酸、缬氨酸、侧链tBu保护酪氨酸、缬氨酸、侧链Trt保护组氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸的树脂，即保护增血压素R₁-Asn-Arg(R₂)-Val-Tyr(R₃)-Val-His(R₄)-Pro-Phe-R₅，其中，R₁为氨基保护基Boc，R₂、R₃、R₄为侧链保护基Pbf、tBu、Trt，R₅为羧基树脂。