[发明专利]一种犬细小病毒蜂胶灭活疫苗及其制备方法

权利要求书

1.一种犬细小病毒蜂胶灭活疫苗，其特征在于：犬细小病毒株在F81细胞上进行病毒繁殖，经过收获、灭活，并以蜂胶作为佐剂混合制成灭活苗。

2.权利要求1所述的灭活疫苗的制备方法，主要包括如下步骤：

1）细小病毒灭活原液的制备；

2）蜂胶溶液的制备；

3）成品疫苗制备：按每ml疫苗含蜂胶干物质含量为8～15mg标准添加蜂胶溶液搅拌15～20分钟，使其充分混合乳化。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述的犬细小病毒灭活原液的制备步骤包括：将生长良好的F81细胞按常规方法传代，待细胞长成80%单层后，倾去生长液，换以含1%毒种的维持液(含2%新生牛血清的MEM)，置36℃继续培养，转瓶转速为8～l0r／h；接种后，每日观察细胞病变，当细胞病变(CPE)达80%左右时即可收获，冻融1次，置-15℃以下冻结保存，待检备用；按病毒液总量的0.2%加入甲醛溶液，充分混匀，置36℃下灭活，待温度升至36℃开始计时，180转/分钟的摇床中不间断摇动，灭活48小时。

4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，蜂胶液制备由以下步骤完成：选取已知纯度的蜂胶，经破碎后过筛，溶于95%的乙醇溶液，再根据要求配成适当浓度的溶液于4℃下保存备用。

5.根据权利要求2-3任一项所述的制备方法，其特征在于，成品疫苗为黄褐色混悬液，密封保存于4-8℃中。

6.权利要求1所述的犬细小病毒蜂胶灭活疫苗的用途，主要是用于犬细小病毒病的免疫。