[发明专利]肝癌早期预警和筛查试剂

权利要求书

1.肝癌早期预警和筛查试剂盒，其特征在于包括有能检测人胚肝血影蛋白基因启动区CpG岛甲基化状态的试剂。

2.根据权利要求1所述的肝癌早期预警和筛查试剂盒，其特征在于：所述的检测人胚肝血影蛋白基因启动区CpG岛甲基化状态的试剂包括独立包装的扩增甲基化的人胚肝血影蛋白启动区CpG岛的引物。

3.根据权利要求2所述的肝癌早期预警和筛查试剂盒，其特征在于：所述的扩增甲基化的人胚肝血影蛋白基因启动区CpG岛的引物为：

正义链引物：5’-GGCGAGTGGTTTTTGATAAAATTATAAAT-3’；

反义链引物：5’-ACATACCACGATTACCGAACCCGAA-3’。

4.根据权利要求2所述的肝癌早期预警和筛查试剂盒，其特征在于：所述的检测人胚肝血影蛋白基因启动区CpG岛甲基化状态的试剂还包括独立包装的扩增非甲基化的人胚肝血影蛋白基因启动区CpG岛的引物。

5.根据权利要求4所述的肝癌早期预警和筛查试剂盒，其特征在于：所述的扩增非甲基化的人胚肝血影蛋白基因启动区CpG岛的引物：

正义链引物：5’-GGTGAGTGGTTTTTGATAAAATTATAAATT-3’；

反义链引物：5’-ACATACCACAATTACCAAACCCAAA-3’。

6.根据权利要求2所述的肝癌早期预警和筛查试剂盒，其特征在于：所述的检测人胚肝血影蛋白基因启动区CpG岛甲基化状态的试剂还包括独立包装的预扩增人胚肝血影蛋白基因启动区CpG岛的引物。

7.根据权利要求6所述的肝癌早期预警和筛查试剂盒，其特征在于：所述的预扩增人胚肝血影蛋白基因启动区CpG岛的引物：

正义链引物：5’-GGAGGGAAGGAAGGGTAAG-3’；

反义链引物：5’-CAACTCAATAAACTCAAACTCCC-3’。

8.根据权利要求2～7任一项所述的肝癌早期预警和筛查试剂盒，其特征在于：所述的检测人胚肝血影蛋白基因启动区CpG岛甲基化状态的试剂还包括独立包装的分离血浆游离DNA的试剂。

9.根据权利要求2～7任一项所述的肝癌早期预警和筛查试剂盒，其特征在于：所述的检测人胚肝血影蛋白基因启动区CpG岛甲基化状态的试剂还包括将DNA链上的胞嘧啶转变成尿嘧啶的试剂。

10.根据权利要求2～7任一项所述的肝癌早期预警和筛查试剂盒，其特征在于：所述将DNA链上的胞嘧啶转变成尿嘧啶的试剂为亚硫酸氢钠。

11.根据权利要求1～10任一项所述的肝癌早期预警和筛查试剂盒，其特征在于：还包括能检测人RASSF1A基因、人p16基因、人GSTP1基因、人E-cadherin基因中至少3种基因的启动区CpG岛甲基化状态的试剂。

12.根据权利要求11所述的肝癌早期预警和筛查试剂盒，其特征在于：所述能检测人RASSF1A基因启动区CpG岛甲基化状态的试剂包括甲基化特异引物：上游引物的核苷酸序列为SEQ ID No.9所示，下游引物的核苷酸序列为SEQ ID No.10所示。

13.根据权利要求11所述的肝癌早期预警和筛查试剂盒，其特征在于：所述能检测人p16基因启动区CpG岛甲基化状态的试剂包括甲基化特异引物：上游引物的核苷酸序列为SEQID No.15所示，下游引物的核苷酸序列为SEQ ID No.16所示。

14.根据权利要求11所述的肝癌早期预警和筛查试剂盒，其特征在于：所述能检测人GSTP1基因启动区CpG岛甲基化状态的试剂包括甲基化特异引物：上游引物的核苷酸序列为SEQ ID No.21所示，下游引物的核苷酸序列为SEQ ID No.22所示。

15.根据权利要求11所述的肝癌早期预警和筛查试剂盒，其特征在于：所述能检测人E-cadherin基因启动区CpG岛甲基化状态的试剂包括甲基化特异引物：上游引物的核苷酸序列为SEQ ID No.27所示，下游引物的核苷酸序列为SEQ ID No.28所示。