[发明专利]一种参与丁醇生成的醇脱氢酶及其应用无效
申请号: | 201210122975.2 | 申请日: | 2012-04-24 |
公开(公告)号: | CN103374589A | 公开(公告)日: | 2013-10-30 |
发明(设计)人: | 赵蒙;蒋宇;杨晟;姜卫红 | 申请(专利权)人: | 中国科学院上海生命科学研究院 |
主分类号: | C12N15/74 | 分类号: | C12N15/74;C12N1/21;C12P7/16;C12R1/145 |
代理公司: | 上海一平知识产权代理有限公司 31266 | 代理人: | 祝莲君;雷芳 |
地址: | 200031 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 参与 丁醇 生成 脱氢酶 及其 应用 | ||
1.一种分离的CA_C3375醇脱氢酶或其编码基因的用途,其特征在于,它被用于调节丙酮丁醇梭菌产生溶剂的能力。
2.如权利要求1所述的CA_C3375醇脱氢酶,其特征在于,所述的溶剂选自下组:乙醇,丙酮,丁醇,或其组合。
3.如权利要求1所述的CA_C3375醇脱氢酶,其特征在于,所述的CA_C3375醇脱氢酶选自下组:
(i)具有SEQ ID NO.:29所示氨基酸序列的多肽;
(ii)将SEQ ID NO.:29所示氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代、缺失或添加而形成的、由(i)衍生的多肽;
(iii)氨基酸序列与SEQ ID NO.:29所示氨基酸序列的同源性≥90%(较佳地≥95%,更佳地≥97%,更佳地≥99%)、由(1)衍生的多肽。
4.如权利要求1所述的CA_C3375醇脱氢酶,其特征在于,所述CA_C3375醇脱氢酶的编码基因是选自下组的一种或多种:
(1)编码如SEQ ID NO.:29所述多肽的多核苷酸;
(2)序列如SEQ ID NO.:1所示的多核苷酸;
(3)序列与SEQ ID NO.:1所示序列的同源性≥95%(较佳地≥97%,更佳的≥99%)的多核苷酸;
(4)与(1)-(3)任一所述的多核苷酸序列互补的多核苷酸。
5.一种提高丙酮丁醇梭菌产生丁醇能力的方法,其特征在于,包括步骤:提高丙酮丁醇梭菌中CA_C3375醇脱氢酶基因的表达水平,或提高丙酮丁醇梭菌中CA_C3375醇脱氢酶的活性。
6.如权利要求5所述的方法,其特征在于,所述的提高是指,与野生型丙酮丁醇梭菌相比,CA_C3375醇脱氢酶基因的mRNA表达水平提高10%以上,或CA_C3375醇脱氢酶的表达或活性上升10%以上;
较佳地,所述的提高通过选自下组的一种或多种方式实现:导入额外的CA_C3375醇脱氢酶、引入提高CA_C3375醇脱氢酶的表达或活力的突变、或引入瞬时表达CA_C3375醇脱氢酶的表达载体。
7.一种丙酮丁醇梭菌,其特征在于,所述丙酮丁醇梭菌中CA_C3375醇脱氢酶基因的表达水平或CA_C3375醇脱氢酶的活性提高。
8.如权利要求7所述的丙酮丁醇梭菌,其特征在于,所述的提高是指,与野生型丙酮丁醇梭菌相比,CA_C3375醇脱氢酶基因的mRNA表达水平提高10-100%,或CA_C3375醇脱氢酶的表达或活性提高10-100%;
较佳地,所述的提高通过选自下组的一种或多种方式实现:导入额外的CA_C3375醇脱氢酶、引入提高CA_C3375醇脱氢酶的表达或活力的突变、或引入瞬时表达CA_C3375醇脱氢酶的表达载体。
9.权利要求7所述丙酮丁醇梭菌的用途,其特征在于,它被用于生产溶剂。
10.一种生产丁醇的方法,其特征在于,包括步骤:
(A)在适合的条件下,培养权利要求7所述的丙酮丁醇梭菌,获得含有丁醇的培养物;和
(B)从所述的培养物中分离和/或纯化丁醇。
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