[发明专利]山羊SH2B1基因单核苷酸多态性位点及其检测方法

权利要求书

1.一种检测山羊SH2B1基因单核苷酸多态性位点的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)、以包含SH2B1基因的待测山羊全基因组DNA为模板，以引物对P2为引物，PCR扩增山羊SH2B1基因；

所述的引物对P2为：

上游引物:5’CCTCCGCTTCAAAGTGCTG 3’

下游引物:5’GCGGGAGTTCTGCGAGTC 3’

(2)、对步骤(1)的扩增产物进行PCR产物的切胶回收及纯化、测序；

(3)、对步骤(2)的纯化产物进行PCR-SSCP检测：首先对纯化的PCR产物分别用变性剂进行变性处理，然后根据聚丙烯酰胺凝胶电泳结果判定其多态性位点的基因型，所述多态性位点包括：

在山羊的SH2B1基因第6033位为G或A的碱基多态性位点，表现为GG，GA两种基因型，所述第6033位为G或A的碱基多态性位点是指扩增产物5’CTCGGCAA 3’序列段中第4位为G或A的碱基多态性位点，基因型GA的体长显著高于纯合基因型GG。

2.如权利要求1所述的检测山羊SH2B1基因单核苷酸多态性位点的方法，其特征在于，所述的PCR扩增反应程序为：95℃预变性4min；94℃变性45s，58℃退火50s，72℃延伸1min，32个循环，最后72℃延伸10min，4℃保存。

3.如权利要求1所述的检测山羊SH2B1基因单核苷酸多态性位点的方法，其特征在于，所述的聚丙烯酰胺凝胶电泳采用10％的聚丙烯酰胺凝胶。