[发明专利]单克隆抗体及其用于检测宫颈疾病的方法

说明书

本分案申请是基于申请号为200680020599.9，申请日为2006年04月26日，发明名称为“单克隆抗体及其用于检测宫颈疾病的方法”的中国专利申请的分案申请。 

发明领域

本发明涉及能与MCM2结合的抗体和使用这些抗体的方法，尤其是用于宫颈疾病的诊断。 

发明背景 

宫颈癌是妇女中第二种最常见的肿瘤，占所有女性癌症的大约12％，而且导致每年大约250,000例死亡。Baldwin等(2003)NatureReviews Cancer 3：1-10。在许多发展中国家，群体筛选方案还没有，临床问题更加严重。在这些国家中，宫颈癌是妇女癌症死亡的第一位原因。 

宫颈癌的大多数病例表现为鳞状细胞癌，虽然也看到腺癌。宫颈癌可通过群体筛选预防，因为它通过明确的非侵害性上皮内阶段进化，其可以从形态学上辨别。Williams等(1998)Proc.Natl.Acad.SciUSA 95：14932-14937。虽然不了解正常细胞如何变为转化的，但是通过宫颈上皮内瘤形成(CIN)，从正常的，复层上皮到侵害性癌的组织病理学变化的连续谱的概念已经众所公认多年。宫颈癌的前体是发育异常，而且本领域称之为CIN或鳞状上皮内病变(SIL)。鳞状上皮内异常可使用三级(CIN)或二级(Bethesda)系统进行分类。在Bethesda系统下，轻度鳞状上皮内病变(LSIL)，相当于CINI和HPV感染，通常表现生产性HPV感染，同时发展为侵害性疾病的风险相对较低。高度鳞状上皮内病变(HSIL)，相当于三级系统中的CINII和CINIII，显示高于LSIL的发展为宫颈癌的风险，虽然LSIL和HSIL都被认为是恶性肿瘤的可能性前体。在该系统下患者样本也可分类为ASCUS(未明确意义 的非典型鳞状细胞)或AGUS(未明确意义的非典型腺细胞)。 

通过人乳头状瘤病毒(HPV)的高风险类型，如类型16，18和31，已经建立了宫颈癌与感染的强烈关联。实际上，大量流行病学和分子生物学证据已经确定HPV感染为宫颈癌中的病因因素。而且，在85％或更多的高度子宫劲疾病病例中发现了HPV。不过，HPV感染是很常见的，可能发生在5-15％的年龄超过30岁的妇女中，但是仅有少数HPV阳性妇女将发展成高度子宫颈疾病或癌。HPV单独存在仅仅是感染的指示，而不是高度子宫颈疾病的指示，并且，因此，仅仅测试HPV感染导致许多假阳性。参见，例如，Wright等(2004)Obstet.Gynecol.103：304-309。 

最新资料表明，HPV感染子宫颈的基础组织内的基底干细胞。干细胞分化成成熟的角质细胞，同时导致细胞迁移到复层宫颈上皮，与HPV病毒复制和细胞的再感染相关。在这种病毒复制过程期间，许多细胞改变发生，包括细胞循环下调，活性增殖，DNA复制，转录激活和基因组不稳定性(Crum(2000)Modern Pathology 13：243-251；Middleton等(2003)J Virol.77：10186-10201；Pett等(2004)Cancer Res.64：1359-1368)。 

大多数HPV感染本质上是瞬时的，同时病毒感染能在12个月的时期内自身消退。对于那些出现HPV的一种或多种致癌亚型的持续感染的个体，与没有HPV感染的患者相比，存在肿瘤形成发展的风险。考虑到HPV在宫颈肿瘤形成的发展过程中的重要性，HPV的临床检测已经成为鉴定患者处于宫颈的肿瘤形成发展风险中的重要诊断工具。基于HPV的筛选对于子宫颈疾病的临床效用在于它的阴性预测值。HPV阴性结果结合正常的Pap涂片的历史是没有疾病状况以及随后的1-3年期间较低的宫颈肿瘤形成发展风险的极好的指标。但是，阳性HPV结果不是子宫颈疾病的诊断；更确切地它是感染的指示。尽管大多数HPV感染是瞬时的并且将在12个月的时期内自发地清除，但是高风险的HPV病毒亚型的持续感染标志较高的宫颈肿瘤形成发展风险。为了增补HPV测试，鉴定与宫颈肿瘤形成相关的分子标记，期望能提高子 宫颈疾病诊断的临床特异性。