[发明专利]一种超敏C反应蛋白检测方法及检测试剂

说明书

 

技术领域

本发明涉及免疫检测，具体涉及一种超敏C反应蛋白检测方法及检测试剂。

背景技术

1930年，Tillett和Francis首次在急性大叶性肺炎患者的血清中发现一种能在Ca2+存在时与肺炎球菌细胞壁中的C－多糖发生特异性沉淀反应的物质。 1941年Avery等测知它是一种蛋白质，故称为C反应蛋白(CRP)。 C反应蛋白是一类正急性时相反应蛋白，随着损伤、炎症或各类疾病迅速增加。

常规C反应蛋白检测试剂盒的检测范围3mg/L—350mg/L，目前超敏C反应蛋白试剂盒最宽的检测范围是1mg/L—350mg/L，还可以继续优化，让超敏C反应蛋白能检测到更低含量。

发明内容

为解决现有技术的上述问题，本发明提供一种超敏C反应蛋白检测方法及检测试剂。

本发明的超敏C反应蛋白检测方法，其特征是，包括以下步骤：

（1）测试多个已知浓度的标准液，建立浓度与散射值的标准数据库；

（2）将标准曲线制作成试剂的测试卡，在特定蛋白分析仪上刷卡后即把标准数据库录入仪器计算软件，通过测试样本的散射值后通过计算可以得到样本的浓度结果。

其中，步骤（1）测试多个已知浓度的标准液，建立浓度与散射值的标准数据库的操作为：①用处理稀释液将已知浓度的标准品稀释成多个不同浓度；②将多个已知不同浓度的C反应蛋白标准品分别与缓冲液R1试剂混匀制得抗原标准液，然后将乳胶抗体R2试剂加入抗原标准液、同时用特定蛋白分析仪测定标准品散色值，从而建立散射值-浓度对应标准数据库；③测定待检样品的散色值：用处理稀释液按测试要求稀释待检样品，将稀释样本与缓冲液R1试剂混匀制得抗原液，然后将乳胶抗体R2试剂加入抗原液、同时用特定蛋白分析仪测定待检样品的散色值；④查询C反应蛋白浓度：将③步骤测定的散色值与散射值-浓度数据库对照，查询得知C反应蛋白浓度。

所述处理稀释液试剂包括如下组分：SDS 0.1%、叠氮钠0.12%.

所述缓冲液R1试剂包括如下组分：NaCl 0.9%、Tirs 1.2%、Na₂CO₃ 0.06%；

所述乳胶抗体R2试剂包括如下组分：羊抗人C反应蛋白抗体致敏的苯乙烯乳胶0.6%、甘氨酸1.1%、碳酸钠0.1%、碳酸氢钠0.1%；

本发明所述超敏C反应蛋白检测试剂，该检测试剂包含处理稀释液、缓冲液R1试剂、乳胶抗体R2试剂，其中，处理稀释液包含SDS 0.1%～0.５％、叠氮钠0.12%～0.4%，试剂R1包含 NaCl 0.9%～2.1%、Tirs 1.2%～2.5%、Na₂CO₃ 0.06%～0.1%；试剂R2包含羊抗人C反应蛋白抗体致敏的苯乙烯乳胶0.2%～0.7%、甘氨酸1.1%～2%、碳酸钠0.1%～0.9%、碳酸氢钠0.1%～0.9%；

优选地，所述处理稀释液试剂包括如下组分：SDS 0.1%、叠氮钠0.12%；

所述缓冲液R1试剂包括如下组分：NaCl 0.9%、Tirs 1.2%、Na₂CO₃ 0.06%；

所述乳胶抗体R2试剂包括如下组分：羊抗人C反应蛋白抗体致敏的苯乙烯乳胶0.6%、甘氨酸1.1%、碳酸钠0.1%、碳酸氢钠0.1%。

该检测方法及检测试剂检测速度快，特异性高，可以在特定蛋白分析仪上检测体液，特别是血液中微量生物化学物质，检测范围为0.4mg/L-350mg/L，扩大了超敏C反应蛋白的检测范围。

附图说明

    图1是散射值与浓度的曲线图。

具体实施方式

以下提供本发明的一些优选实施例，以助于进一步理解本发明，但本发明的保护范围并不仅限于这些优选实施例。

实施例1

 以静脉全血为样本测试超敏C反应蛋白，包括如下步骤：