[发明专利]一种鉴别鸭瘟病毒强毒与疫苗毒的PCR检测方法无效

专利信息
申请号: 201210116719.2 申请日: 2012-04-20
公开(公告)号: CN102643932A 公开(公告)日: 2012-08-22
发明(设计)人: 程安春;尹雪琴;汪铭书;陈孝跃 申请(专利权)人: 四川农业大学
主分类号: C12Q1/70 分类号: C12Q1/70;C12Q1/68
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 611130 四*** 国省代码: 四川;51
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摘要:
搜索关键词: 一种 鉴别 瘟病 毒强毒 疫苗 pcr 检测 方法
【权利要求书】:

1.一种鉴别鸭瘟病毒强毒与疫苗毒的PCR检测方法,其特征是:具体步骤为:

a设计扩增鸭瘟病毒UL2基因的特异性引物,引物序列为:上游引物P1:5’-ACGAGGGAGACCCAAATGAC-3’,下游引物P2:5’-TTTATACTGTTCCACAAGGAAGTTG-3’;

b按常规方法提取样品中的核酸;

c.PCR检测,同时设立阴性对照;PCR检测体系具体为:2×傻瓜PCR Mixtrue 12.5μL,P1(20pmol/μL)1ul,P2(20pmol/μL)1ul,模板溶液1μL,最后用超纯水补至25μL;PCR检测体系扩增参数具体为:95℃预变性5min,95℃变性1min,58.3℃退火1min,72℃延伸1min,循环40次,最后72℃延伸10min;

d琼脂糖凝胶上电泳,紫外灯照射观察扩增片段的长度,若PCR扩增条带为1018bp,则待测样品含有鸭瘟病毒强毒,若PCR扩增条带为490bp,则待测样品含有鸭瘟病毒弱毒。

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