[发明专利]一种鉴别鸭瘟病毒强毒与疫苗毒的PCR检测方法无效
| 申请号： | 201210116719.2 | 申请日： | 2012-04-20 |
| 公开（公告）号： | CN102643932A | 公开（公告）日： | 2012-08-22 |
| 发明（设计）人： | 程安春;尹雪琴;汪铭书;陈孝跃 | 申请（专利权）人： | 四川农业大学 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 611130 四*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 鉴别 瘟病 毒强毒 疫苗 pcr 检测 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种鉴别鸭瘟病毒强毒与疫苗毒的PCR检测方法，其特征是：具体步骤为：
a设计扩增鸭瘟病毒UL2基因的特异性引物，引物序列为：上游引物P1：5’-ACGAGGGAGACCCAAATGAC-3’，下游引物P2：5’-TTTATACTGTTCCACAAGGAAGTTG-3’；
b按常规方法提取样品中的核酸；
c.PCR检测，同时设立阴性对照；PCR检测体系具体为：2×傻瓜PCR Mixtrue 12.5μL，P1(20pmol/μL)1ul，P2(20pmol/μL)1ul，模板溶液1μL，最后用超纯水补至25μL；PCR检测体系扩增参数具体为：95℃预变性5min，95℃变性1min，58.3℃退火1min，72℃延伸1min，循环40次，最后72℃延伸10min；
d琼脂糖凝胶上电泳，紫外灯照射观察扩增片段的长度，若PCR扩增条带为1018bp，则待测样品含有鸭瘟病毒强毒，若PCR扩增条带为490bp，则待测样品含有鸭瘟病毒弱毒。
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