[发明专利]狼山鸡POU1F1基因单核苷酸多态性位点及其检测方法

权利要求书

1.狼山鸡POU1F1基因的单核苷酸多态性位点，其特征在于：所述基因单核苷酸多态性位点包括：

在狼山鸡POU1F1基因的第3109位为G或A的碱基多态性位点。

2.权利要求1所述的狼山鸡POU1F1基因的单核苷酸多态性位点的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)、以包含POU1F1基因的待测狼山鸡全基因组DNA为模板，以引物对P为引物，PCR扩增狼山鸡POU1F1基因；

所述的引物对P为：

上游引物：5’TTTCTTTTGGTTTTGTTCAG3’

下游引物：5’TTTTCAGCCTTTTGTTGG3’；

(2)、对步骤(1)的PCR扩增产物进行切胶回收及纯化、测序；

(3)、对步骤(2)的纯化产物进行PCR-SSCP检测：用变性剂对PCR扩增产物进行变性处理，再进行聚丙烯酰胺凝胶电泳，根据聚丙烯酰胺凝胶电泳结果鉴定狼山鸡POU1F1基因的多态性位点。

3.如权利要求2所述的狼山鸡POU1F1基因的单核苷酸多态性位点的检测方法，其特征在于：所述的PCR扩增的反应程序为：95℃预变性4min；94℃变性50s，59℃退火50s，72℃延伸1min，33个循环，最后72℃延伸10min，4℃保存。

4.根据权利要求2所述的狼山鸡POU1F1基因的单核苷酸多态性位点的检测方法，其特征在于：步骤(2)中用琼脂糖凝胶电泳对PCR扩增产物进行切胶回收及纯化、测序。

5.根据权利要求4所述的狼山鸡POU1F1基因的单核苷酸多态性位点的检测方法，其特征在于：步骤(2)中琼脂糖凝胶电泳中所用琼脂糖凝胶的质量浓度为1.5％。

6.根据权利要求2所述的狼山鸡POU1F1基因的单核苷酸多态性位点的检测方法，其特征在于：步骤(3)中聚丙烯酰胺凝胶的质量浓度为10％。

7.如权利要求2所述的狼山鸡POU1F1基因的单核苷酸多态性的检测方法，其特征在于：步骤(3)中根据10％的聚丙烯酰胺凝胶电泳结果鉴定狼山鸡POU1F1基因的多态性位点，所述多态性位点包括：在狼山鸡POU1F1基因的第3109位为G或A的碱基多态性位点，表现为CC，CD，DD三种基因型。