[发明专利]幽门螺旋杆菌毒力蛋白质组的制备方法无效
| 申请号： | 201210113718.2 | 申请日： | 2012-04-18 |
| 公开（公告）号： | CN102643850A | 公开（公告）日： | 2012-08-22 |
| 发明（设计）人： | 金守光;杨洪江 | 申请（专利权）人： | 天津天佛罗生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70;C12N9/80;C07K14/20;C07K1/22;C12R1/19;C12R1/01 |
| 代理公司： | 天津盛理知识产权代理有限公司 12209 | 代理人： | 王来佳 |
| 地址： | 300191 天津市南开区新技*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 幽门 螺旋 杆菌 毒力 蛋白质 制备 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种幽门螺旋杆菌毒力蛋白质组的制备方法，其特征在于：步骤如下：
(1)分别扩增6种毒力蛋白基因，针对6种毒力蛋白设计引物，引物序列见序列1至序列12，引物分别插入限制性内切酶位点；
(2)分别克隆6种毒力蛋白编码基因；
(3)分别亚克隆6种毒力蛋白编码基因到表达载体上；
(4)大肠杆菌宿主细胞内分别表达6种毒力蛋白；
(5)纯化；
所述6种毒力蛋白为细胞毒素相关蛋白CagA、空泡毒素蛋白VacA、鞭毛蛋白亚基A、鞭毛蛋白亚基B、尿素酶亚基A和尿素酶亚基B。
2.根据权利要求1所述的幽门螺旋杆菌毒力蛋白质组的制备方法，其特征在于：所述步骤(2)的6种毒力蛋白编码基因分别克隆到TOPO TAKits试剂盒或T-EASAY试剂盒的质粒载体上。
3.根据权利要求1所述的幽门螺旋杆菌毒力蛋白质组的制备方法，其特征在于：所述步骤(3)的6种毒力蛋白编码基因分别亚克隆到表达载体pQE30上。
4.根据权利要求1所述的幽门螺旋杆菌毒力蛋白质组的制备方法，其特征在于：所述步骤(5)利用Ni-NTA纯化填料制备的层析柱，分离纯化这6种重组毒力蛋白。
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