[发明专利]一种检测肺炎支原体的LAMP试剂盒有效
申请号: | 201210112439.4 | 申请日: | 2012-04-16 |
公开(公告)号: | CN102618655A | 公开(公告)日: | 2012-08-01 |
发明(设计)人: | 赵飞;张建中;顾一心;陶晓霞;何利华;孟凡亮;肖迪 | 申请(专利权)人: | 中国疾病预防控制中心传染病预防控制所 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12N15/11;C12R1/35 |
代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人: | 王朋飞;王加岭 |
地址: | 102206 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 检测 肺炎 支原体 lamp 试剂盒 | ||
1.一种用于检测肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae)的靶序列,其具有SEQ ID NO.5所示的序列或其特异性片段。
2.用于扩增权利要求1所述靶序列的特异性引物组合。
3.如权利要求2所述的特异性LAMP引物组合,包括以下4条引物:
F3:5’-TCTTACCACTGTTAACGGCC-3’;
B3:5’-CCGCTTTGGTCAACACATCA-3’;
FIP:5’-ACGGCAACACGTAATCAGGTCATCCAGTCAAGGTCCCCAA-3’;
BIP:5’-AGGACTTGCCATTGGAATCCCAGATAGCGCAAACCCAGCC-3’。
4.权利要求3所述的引物组在制备肺炎支原体的检测试剂盒或检测试剂中的应用。
5.一种含有权利要求3所述引物组的检测试剂。
6.一种含有权利要求3所述引物组的肺炎支原体的LAMP检测试剂盒。
7.如权利要求6所述的试剂盒,其特征在于,还包含变色指示剂羟基萘酚蓝。
8.权利要求6或7所述的试剂盒在检测肺炎支原体中的应用。
9.如权利要求8所述的应用,其特征在于,25μL LAMP检测体系的具体配置为:10mM dNTP混合溶液2.5μl,3mM羟基萘酚蓝1μl,4M甜菜碱1μl,8U/μl Bst酶1μl,10×Bst buffer2.5μl,10μM F3引物0.5μl,10μM B3引物0.5μl,100μM FIP引物0.4μl,100μM BIP引物0.4μl,150mM硫酸镁1μl,去核酸水13.2μl,模板1μl。
10.如权利要求8所述的应用,其特征在于,检测反应条件为:63℃恒温1h,85℃3min,然后终止反应。
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