[发明专利]大曲酒窖泥微生物总DNA提取的前处理方法无效
申请号: | 201210107413.0 | 申请日: | 2012-04-13 |
公开(公告)号: | CN102643798A | 公开(公告)日: | 2012-08-22 |
发明(设计)人: | 陈强;熊亚;唐玉明;吴英英;赵珂;陈翠平;徐勇;刘汉军;王强锋;任道群 | 申请(专利权)人: | 四川农业大学 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 611130 四*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 大曲 酒窖 微生物 dna 提取 处理 方法 | ||
1.一种大曲酒窖泥微生物总DNA提取的前处理方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)称取适量窖泥,放入灭菌的离心管中,加入灭菌生理盐水,按照质量百分比计,生理盐水含0.4%-0.6%吐温-80,充分振荡3-5min,4℃,9000r/min离心12min,弃去上清液;同法洗涤样品2次;
(2)向上述样品加入无水乙醇,充分振荡3-5min洗涤样品,4℃,9000rpm离心12min,弃去上清液;同法洗涤样品2次;
(3)加入无菌超纯水,混合均匀,振荡3-5min,洗涤样品,4℃,9000rpm离心12min,弃去上清液;
(4)将充分洗涤的窖泥样品用双层灭菌纱布包裹离心管口,-70℃冷冻30min,低温真空抽干至粉状,保存于-20℃冰箱,用于提取窖泥微生物总DNA;
所述步骤(1)-(3)中,洗涤用灭菌生理盐水、无水乙醇、无菌超纯水加入量,按窖泥与溶液的重量体积比1∶1-2添加。
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