[发明专利]一种快速从天然产物中筛选脂肪酶抑制剂的方法

权利要求书

1.一种从天然产物中筛选具有脂肪酶抑制作用的产物的方法，其特征在于，包括以下操作步骤：

步骤1，待测样品的配制

步骤2，反应底物的配制

步骤3，脂肪酶的配制

步骤4，将配制好的待测样品，反应底物，脂肪酶混合后进行反应

步骤5，测定脂肪酶活性，计算抑制率。

2.根据权利要求1的方法，其特征在于，其中步骤1中所述待测样品为天然产物，动物，植物，微生物，岩石，油脂，胶体物质。

3.根据权利要求2的方法，其特征在于，其中步骤1中所述待测样品为中药产物，可食用的食物，保健品，饮料；优选为具有药用价值的中草药产物，药食同源的产物；更优选为中药材，茶叶。

4.根据权利要求1的方法，其特征在于，其中步骤1中所述待测样品的配制，采用压榨、有机溶剂提取或水提取的方式，将提取物直接配制成一定浓度的液体，或将提取得到的产物进一步经过萃取，层析，沉淀过程，得到比较纯的提取物后再配制成一定浓度的溶液，配制溶液采用的溶剂选自有机溶剂，水或缓冲溶液。

5.根据权利要求1的方法，其特征在于，其中步骤2中所述反应底物为2，4-二硝基苯酚丁酸酯。

6.根据权利要求1的方法，其特征在于，其中步骤2中所述反应底物的配制，方法如下：称取1-10g的2，4-二硝基苯酚丁酸酯溶于5-50mL的缓冲液中；其中缓冲液优选为磷酸盐缓冲液。

7.根据权利要求1的方法，其特征在于，其中步骤2中反应底物的配制，方法如下：称取5.42g的2，4-二硝基苯酚丁酸酯溶于10mL的磷酸盐缓冲液中。

8.根据权利要求1的方法，其特征在于，其中步骤3中所述脂肪酶选用胰脂肪酶。

9.根据权利要求1的方法，其特征在于，其中步骤3中所述脂肪酶溶液的配制，方法如下：用0.1-0.5mol/L pH6-7的磷酸盐缓冲液配置成100-200U/mL脂肪酶溶液；优选用0.1mol/L pH6.8的磷酸盐缓冲液配置成200U/mL脂肪酶溶液。

10.根据权利要求1的方法，其特征在于，其中步骤4中所述反应条件为：37℃下反应3-15min，优选5min。

11.根据权利要求1的方法，其特征在于，其中步骤5中所述测定脂肪酶活性的方法如下：

反应结束后，取适量反应溶液，使用紫外分光光度计，于360nm测定反应体系的OD值

其中所述抑制率的计算方法为：