[发明专利]一种多参数免疫层析检测试纸及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种可用于生物医学等指标多参数并行化的快速检测技术，特别是一种多参数免疫层析检测试纸及其制备方法。

背景技术

固相膜免疫分析(solid phase membrane-based immunoassay)与固相酶免疫分析(EL ISA)相类似，其特点是以微孔膜作为固相。标记物可用酶和各种有色微粒子，如彩色胶乳、胶体金、胶体硒等，以红色的胶体金最为常用。固相膜的特点在于其多孔性，像滤纸一样。固相膜可被液体穿过流出，液体也可以通过毛细作用在膜上向前移行。利用这种性能建立了两种不同类型的快速检测方法。在固相膜免疫分析中，有穿流(flow through)形式的，称为免疫渗滤分析(immunofiltration assay，IFA)；横流(lateral flow)形式的，称为免疫层析分析(immunochromatographic assay，ICA)。因常用胶体金作为标记物，国内文献中称穿流法为免疫金溶胶斑点法或滴金免疫测定法等，称横流法为胶体金免疫层析法等，统称“金标”。

本文为叙述方便，以胶体金免疫层析检测技术及胶体金免疫层析检测试纸泛指这种固相膜横流法免疫层析检测技术及制备的产品，而不特指其标记物为胶体金。

胶体金免疫层析检测技术主要是将特异性的抗原或抗体以条带状固定在固相膜(如硝酸纤维素膜，nitrocellulose memberane，NC膜)上，胶体颗粒标记的抗原或抗体吸附在结合垫上，当待测样品加到试纸一端的样品垫上后，通过静压力和毛细作用向前移动，溶解结合垫上的胶体颗粒标记试剂后相互反应，在移动至固定的抗原或抗体的区域时，待测物和胶体颗粒标记试剂的复合物又与之发生特异性结合而被截留，聚集在检测带上，通过可目测的胶体颗粒标记物得到直观的显色结果。而游离标记物则越过检测带，达到与结合标记物自动分离的目的。

胶体金免疫层析检测试纸主要由样品垫(Sample pad)、结合垫(Conjugate pad)、硝酸纤维素膜和吸水垫(Absorbent pad)组成，固相膜上有两条线，一条为检测线(Test line，简称T线)，另一条为质控线(Control line，简称C线)，图13为现有技术中的胶体金免疫层析检测试纸的结构示意图。

多元化检测是固相膜免疫分析的一个重要发展方向，人们已经开发出许多多元检测系统，可同时检测多种项目，如献血员筛选的免疫层析检测试纸可同时检测HBsAg、抗-HIV、抗-HCV和梅毒抗体，HBsAg、抗-HBc、HBeAg三项指标检测乙肝等，肝脏肿瘤标记物AFP/CEA也可以同时检测。但相关内容多见于文献研究，市售产品应用不多。

相关的专利申请很多。“心脑血管疾病三通道检测卡”(200910043849.6)胶体金膜为含抗神经元特异性烯醇化酶抗体、抗髓鞘碱性蛋白抗体和抗S-100β蛋白抗体胶体金标记物的玻璃纤维膜，硝酸纤维素膜上有3条检测带，分别含抗神经元特异性烯醇化酶抗体、抗髓鞘碱性蛋白抗体和抗S-100β蛋白抗体，另有1条含抗兔抗体或抗鼠抗体的质控带。