[发明专利]南极假单胞菌生防菌株及其生防制剂的制备方法有效

专利信息
申请号: 201210097015.5 申请日: 2012-03-15
公开(公告)号: CN103031257A 公开(公告)日: 2013-04-10
发明(设计)人: 何培青;林学政;黄晓航;沈继红 申请(专利权)人: 国家海洋局第一海洋研究所
主分类号: C12N1/20 分类号: C12N1/20;A01N63/02;A01P3/00;C12R1/38
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 266061 山*** 国省代码: 山东;37
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摘要:
搜索关键词: 南极 假单胞菌生防 菌株 及其 制剂 制备 方法
【权利要求书】:

1.一种南极假单胞菌生防菌株,其特征在于是从南极海冰或海泥中分离获得的海洋细菌,鉴定确认为:参椐的生物材料(株):P4-11,分类命名为:假单胞菌Pseudomonas sp.,分子鉴定确认为假单胞菌Pseudomonas属,命名为Pseudomonas sp.P4-11。 

2.如权利要求1所述的一种南极假单胞菌生防菌株,其特征在于所述的海洋细菌,其保存方法是采用试管斜面法,培养基:蛋白胨3-5g,酵母粉0.5-1g,琼脂粉15-17g,陈海水120-200毫升,自来水800-880毫升,pH值7.0-7.2,在试管斜面上划线接种生防菌株,于10-15℃,培养24-48小时后,于3-5℃保存。 

3.专用于南极假单胞菌生防菌株的生防制剂的制备方法,其特征在于保存的生防菌株制备发酵种子液,是将试管斜面保存的生防菌株接种于种子培养基中,该培养基的组分为:蛋白胨3-5g,酵母粉0.5-1g,陈海水120-200毫升,自来水800-880毫升,pH值7.0-7.2,于10-15℃,150转/分钟振荡培养24-48小时后进行深层发酵获得。 

4.如权利要求3所述的专用于南极假单胞菌生防菌株的生防制剂的制备方法,其特征在于制备的发酵种子液进行深层发酵,是在培养基:麸皮5-6g,酵母粉3g-4g,陈海水150毫升,自来水850毫升,灭菌后pH值为7.0-7.2条件下进行,100L发酵罐的加料量为70L,按以5-7%质量百分数接种制备的种子液,发酵温度利用外接低温循环水控制,罐内温度保持在13℃±1℃;罐内压力控制在0.02Pa;搅拌速度为220-250转/分,通过空气压缩机向罐内提供发酵过程中需要的氧气;在培养基中加入300-350毫升豆油作为消泡剂,发酵96-120小时菌株数量可达109个/毫升。 

5.如权利要求3或4所述的专用于南极假单胞菌生防菌株的生防制剂的制备方法,其特征在于深层发酵的发酵液制备生防制剂,是将假单胞菌Pseudomonas sp.P4-11菌株的发酵液,添加生长营养元素后,制成生防菌株制剂,于常温保存,该生长营养元素包括:硫酸铵0.15-0.19克,硫酸锌0.4-0.54克,磷酸钙0.3-0.59克,硝酸钾0.82-0.92克,过磷酸钙0.2-0.33克,硫酸铁0.10-0.12克;硼酸、硫酸锰、硫酸锌、硫酸铜分别为0.0006克;生防菌株发酵液1000mL,菌株制剂外观为淡黄色液体,活菌数量达109个/毫升。 

6.如权利要求5所述的专用于南极假单胞菌生防菌株的生防制剂的制备方法,其特征在于所制备的生防制剂可抑制或预防尖刀镰孢菌、辣椒疫霉和大丽轮枝菌的植物病原真菌的产生。 

7.如权利要求5所述的专用于南极假单胞菌生防菌株的生防制剂的制备方法,其特征在于所制备的生防制剂稀释5-10倍后,用于大棚黄瓜白粉病的防治。 

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