[发明专利]银杏蜜环复方制剂的质量检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及药物的质量检测方法，具体涉及银杏蜜环复方制剂的的质量检测方法，尤其是采用薄层色谱法鉴别蜜环菌粉、采用高效液相色谱法测定腺苷的含量的质量检测方法。

背景技术

银杏蜜环复方制剂是选用近代天然植物药研究的热点活性物质银杏叶提取物，与我国传统中药天麻蜜环菌的有效成份进行科学组方，运用现代制剂工艺制成的复方制剂，目前国内只有银杏蜜环口服溶液一种剂型上市生产销售。

银杏叶是一种具有很高药用价值的植物，银杏树是中国古老的树种之一，地球生命历经千亿年的变动，尤其是第四世纪冰川覆盖之后，只有银杏仍保持它最原始的面貌，在生物演化学史上被称为“活化石”。银杏叶在以往的本草之类药书中记载较少，直到20世纪30年代，日本和西德才开始了银杏叶的研究。随着现代药理研究的不断深入，发现银杏叶中不但含有黄酮类物质，而且还有萜内酯类、酚类等化合物，它们卓越的药理作用已被人们逐渐认识，临床应用范围逐步扩大。

银杏叶提取物在人体中的作用，主要是增强血管张力、扩张冠状动脉，软化血管、改善血管通透性，降低血压、降低血脂及胆固醇，抗血小板凝集、减少血栓形成，降低血管内的高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、甘油三酯(TG)，从而达到降血压、降血脂、降血粘的功效。

现代研究表明银杏叶含黄酮类成分银杏双黄酮(ginkgetin)、异银杏双黄酮(isoginkgetin)、去甲基银杏双黄酮(bilobetin)、芸香甙、山柰素-3-鼠李糖葡萄糖甙、山柰素、槲皮素、异鼠李素(isorhamnetin)等；另含苦味成分银杏三内酯A(ginkgolideA)、B、C及银杏新内酯A(bilobalide A)；酸类成分毒八角酸(shikimic acid)、D-糖质酸(D-glucaric acid)、白果酸(ginkgolic acid).尚含白果醇(ginnol)、白果酮(ginnone)、廿九烷、廿八醇、α-已烯醛、β-谷甾醇、豆甾醇及维生素等。

目前国内外对银杏叶提取物的定性定量检测研究较深入，《中华人民共和国药典2010版》银杏叶提取物标准中，既有定性鉴别方法，也有总黄酮醇苷及萜类内酯两个定量测定方法。

蜜环菌属担子菌纲伞菌目真菌的一属，是天麻不可缺少的互惠共生菌。蜜环菌分布很广，国内大部分省市均有。蜜环菌营养丰富，还具有药用价值。据报道，干菇含粗蛋白11.4％，

脂肪5.2％，碳水化合物75.9％，纤维素5.8％，灰分7.5％，热量384千卡。蜜环菌的固体发酵制品可代替天麻入药，对高血压椎基底动脉供血不足、美尼尔氏症、植物神经功能紊乱等疾病引起眩晕的病人，治疗效果较好，对肢麻、失眠、耳鸣、中风后遗症等也有一定的疗效。

目前对蜜环菌化学成分的研究相比银杏叶提取物要落后很多，主要集中在脂溶性的倍半萜芳香酸酯类化合物以及水溶性的蜜环菌胞内多糖类成分。由于化学成分研究薄弱，所以对蜜环菌的定性定量检测研究就更少了，为数不多的研究都是集中在蜜环菌的石油醚提取物等脂溶性成分，对于蜜环菌水溶性成分则没有专属性的定性定量检测方法，

目前唯一获准上市的银杏蜜环口服溶液，该产品质量标准收载于国家食品药品监督管理局《国家药品标准-化学药品地方标准上升国家标准》第十六册，标准号WS₁-XG-004-2001。该标准中仅有银杏叶提取物的薄层鉴别方法和银杏叶总黄酮醇苷的含量测定方法，缺乏蜜环菌的定性鉴别项目和含量测定项目，不能反映出产品是否含有蜜环菌有效成分及产品中蜜环菌的含量，无法有效检测制剂产品的质量。

发明内容

由于银杏蜜环复方制剂制备工艺中，对蜜环菌采用水提醇沉工艺，因此该制剂中基本不含有蜜环菌倍半萜芳香酸酯类化合物等脂溶性成分，也没有多糖类成分。发明人经过大量实验，克服了现有技术中的不足，研究出了针对银杏蜜环复方制剂中的蜜环菌水溶性成分的定性定量检测方法，即采用薄层色谱法鉴别银杏蜜环复方制剂中含有蜜环菌粉；采用高效液相色谱法测定银杏蜜环复方制剂中腺苷的含量。

薄层色谱法鉴别银杏蜜环制剂中含有蜜环菌粉的条件是：

色谱条件：薄层板硅胶G

展开剂正丁醇-乙酸-水(4∶1∶1～7∶1∶1)

显色剂茚三酮乙醇溶液

对照品溶液的制备：取蜜环菌对照药材加水，煮沸，保持微沸，滤过，滤液蒸干，残渣加稀乙醇溶解，作为对照药材溶液；

供试品溶液的制备：取本品，加乙醇和水，超声处理，滤过，滤液蒸干，残渣加稀乙醇溶解，作为供试品溶液；