[发明专利]一种蓝莓果酒发酵酵母的选育方法

说明书

技术领域

本发明涉及果酒发酵酵母菌的选育方法技术领域，特别是涉及一种蓝莓果酒发酵酵母的选育方法。

背景技术

蓝莓（Blueberry）学名越桔，属于杜鹃花科越桔属植物，具有较高的营养保健功能，在美国、法国、日本等国誉为“ 黄金浆果 ” 、“神奇果”。研究表明：蓝莓除营养丰富以外，还有改善大脑记忆力，减少人体胆固醇积累，防止心脏病和尿路感染，增强胶原质，调节血糖，改善夜视和治疗腹泻等功效。

蓝莓不仅具有营养价值还具有较高的经济价值。蓝莓深加工产品中，蓝莓精品果酒市场价格最高可达5万元/750ml，蓝莓中高档果酒市场价格也可达1000～5000元/750ml以上，普通蓝莓酒价格在300～500元/750ml，是其它普通果酒价格的30～40倍。因此，发展蓝莓果酒产业对调整农业产业结及发展区域特色经济具有重要意义。

蓝莓果酒传统制作方法中采用普通的发酵酵母，发酵周期长，酒精度底，含糖量高，严重影响成品口感与香气，造成了蓝莓果酒独特香气的缺失与不和谐，产品特色风味不突出等问题，在一定程度上阻碍了蓝莓果酒的发展。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是克服现有蓝莓果酒生产过程中发酵周期长，产品酒精度偏低，蓝莓天然香气的流失与不和谐，产品特色风味不突出等缺陷，提供一种蓝莓果酒发酵酵母的选育方法。

为了解决上述技术问题，本发明采用如下的技术方案：

本发明蓝莓果酒发酵酵母的选育方法包括如下步骤：

（1）酵母菌的活化：取拉斐酵母菌种接种至装有蓝莓汁液体培养基的锥形瓶；于22℃恒温培养箱中130r/min振荡培养15h，然后接种于斜面蓝莓汁固体培养基上，采用22℃恒温培养15h，得到完全活化的正常生长的拉斐酵母菌；

（2）紫外光诱变：用蓝莓汁液培养基将完全活化的正常生长的拉斐酵母菌稀释至2×10⁶个/mL，于22℃恒温培养15h，取4mL培养液以3000r/min的速度离心15min，弃上清液后加入4mL生理盐水洗涤，在电磁振荡仪上震荡10min，重复2次，制成5mL悬液，将5mL悬液移入无菌培养皿中，加入一无菌磁力转子，置于磁力搅拌器上采用预热30min后功率稳定的30W紫外灯下30cm处照射60s，然后接种于斜面蓝莓汁固体培养基上22℃恒温培养20h，此过程重复5次；

（3）筛选：诱变后挑选在蓝莓汁固体培养基上生长良好，菌落呈中等大小、乳白色、表面光滑和边缘整齐的菌落移接斜面培养即可得蓝莓果酒发酵酵母。

在蓝莓汁液体培养基和蓝莓汁固体培养基中分别加入20mg/250ml青霉素和30mg/250ml链霉素，用以抑制能引起蓝莓汁霉变的有害菌生长。

与现有技术相比，采用拉斐酵母作为发酵酵母，并对其进行选育，比传统方法产酒精能力(即可产生的最大酒精度)强(18％)，即转化1％(V／V)酒精仅需18～19g/L糖，缩短起酵时间（12h），从而降低杂菌污染，使含糖量降低至1～3g/L，用该方法选育的酵母制作的蓝莓果酒，不仅保存了蓝莓独有的风味物质，而且可以降低生产成本，实现规模化、产业化生产，而且该发酵果酒醇和爽口，风味协调，具有纯正、浓郁、优雅和谐的蓝莓独特风味。

具体实施方式

实施例1：

（1）酵母菌的活化：取拉斐酵母菌种接种至装有蓝莓汁液体培养基的锥形瓶；于22℃恒温培养箱中130r/min振荡培养15h，然后接种于斜面蓝莓汁固体培养基上，采用22℃恒温培养15h，得到完全活化的正常生长的拉斐酵母菌；

（2）紫外光诱变：用蓝莓汁液培养基将完全活化的正常生长的拉斐酵母菌稀释至2×10⁶个/mL，于22℃恒温培养15h，取4mL培养液以3000r/min的速度离心15min，弃上清液后加入4mL生理盐水洗涤，在电磁振荡仪上震荡10min，重复2次，制成5mL悬液，将5mL悬液移入无菌培养皿中，加入一无菌磁力转子，置于磁力搅拌器上采用预热30min后功率稳定的30W紫外灯下30cm处照射60s，然后接种于斜面蓝莓汁固体培养基上22℃恒温培养20h，此过程重复5次；

（3）筛选：诱变后挑选在蓝莓汁固体培养基上生长良好，菌落呈中等大小、乳白色、表面光滑和边缘整齐的菌落移接斜面培养即可得蓝莓果酒发酵酵母。

另外，在蓝莓汁液体培养基和蓝莓汁固体培养基中分别加入20mg/250ml青霉素和30mg/250ml链霉素，用以抑制能引起蓝莓汁霉变的有害菌生长。

本方法选育的酵母可降低生产成本，实现蓝莓果酒的规模化、产业化生产。