[发明专利]热淋清颗粒原料提取短叶苏木酚的方法和制剂质控方法

权利要求书

1.从热淋清颗粒的原料例如头花蓼水提物中提取短叶苏木酚和/或槲皮苷的方法，该方法包括以下步骤：

(1)取头花蓼水提物，用60～95％乙醇浸泡5～24小时，超声处理10～120min，过滤，滤液蒸发干燥，残余物用水溶解，过滤，滤液用乙酸乙酯萃取至上层无色，将乙酸乙酯层合并，蒸发干燥，得到乙酸乙酯粗提物；

(2)将步骤(1)所得乙酸乙酯粗提物加载到高速逆流色谱仪(HSCCC)中，用正己烷∶乙酸乙酯∶甲醇∶水(1∶4～6∶0.8～1.2∶4～6)的混合物作为HSCCC溶剂系统进行分离，收集40～90min的流分；必要时重复此分离和收集的操作；将所述流分蒸除溶剂，得到头花蓼二次分离原料物；

(3)在分液漏斗中，按乙酸乙酯∶正丁醇∶0.008～0.012mol/L的磷酸氢二钾溶液＝3.36～5.04∶0.64～0.96∶5的比例(体积比)配置约1500mL的两相溶剂系统，静置分层成上相(固定相)和下相(流动相)，超声脱气；

(4)采用单线圈、头接尾的洗脱方式，首先使管路充满固定相(上相)，主机正转，然后泵入流动相，待流动相流出，两相溶剂在柱中达到平衡状态时，取步骤(2)所得头花蓼二次分离原料物，溶于等体积的上下相中，用注射器进样；

(5)用紫外检测器对流分进行检测，检测波长为250～290nm，同时记录色谱图，根据色谱图用流分收集器自动收集流分，每3min收集一管；分离时间在270min以上；

(6)收集30～40min之间出峰的流分作为流分I，200～260min之间出峰的流分作为流分II；

(7)分别除去流分I和流分II的溶剂，流分I和流分II分别相应地得到组分I和组分II，任选地分别对组分I和组分I进一步精制，组分I为短叶苏木酚，组分II为槲皮苷。

2.根据权利要求1的方法，其中步骤(1)中，所用乙醇是70～90％乙醇。

3.根据权利要求1的方法，其中步骤(1)中，乙醇浸泡的时间是8-15小时。

4.根据权利要求1的方法，其中步骤(1)中，超声处理的时间是15-60min。

5.根据权利要求1的方法，其中步骤(2)中，所述HSCCC溶剂系统是正己烷∶乙酸乙酯∶甲醇∶水(1∶4.5～5.5∶0.9～1.1∶4.5～5.5)的混合物。

6.根据权利要求1的方法，其中步骤(2)中，收集45～80min的流分。

7.根据权利要求1的方法，其中步骤(3)中，所述两相溶剂系统的比例为3.78～4.62∶0.72～0.88∶5。

8.根据权利要求1的方法，其中步骤(3)中，所述磷酸氢二钾溶液的浓度为0.009～0.011mol/L。

9.根据权利要求1的方法，其中步骤(4)中，主机正转的转速为700～1000rpm。

10.根据权利要求1的方法，其中步骤(4)中，向管路泵入流动相的流速为1～3mL/min。

11.根据权利要求1的方法，其中步骤(5)中，所述检测波长为260～280nm。

12.监测头花蓼制剂例如热淋清颗粒制剂质量的方法，该方法包括使用短叶苏木酚作为对照品，使用高效液相色谱法进行检测，测定该制剂中短叶苏木酚的含量、或者不同批次制剂中短叶苏木酚含量的变异、或者每批产品的测定值与均值之间差异。

13.根据权利要求12的方法，其中所述的高效液相色谱法的色谱条件是：使用C₁₈色谱柱，流动相为甲醇和0.2％的磷酸水溶液，梯度洗脱，其中有机相(甲醇)的梯度比例如下：5％(0min)～30％(5min)～65％(20min)～65％(24min)～5％(25min)～5％(30min)，检测波长为272nm。

14.根据权利要求12的方法，其中所述的高效液相色谱法的色谱条件是：使用固定相为Venusil MP C₁₈色谱柱(4.6mm×250mm，5μm，AgelaTechnologie公司)，流动相为甲醇和0.2％的磷酸水溶液，梯度洗脱，其中有机相的梯度比例如下：5％(0min)～30％(5min)～65％(20min)～65％(24min)～5％(25min)～5％(30min)；检测波长为272nm，流速为1.0mL/min，柱温为室温，进样量为20μL。