[发明专利]一种降解煤化工废水中苯酚的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种降解煤化工废水中苯酚的方法，尤其是涉及一种利用驯化后的枯草芽孢杆菌降解煤化工废水中苯酚的方法。

背景技术

在全球对替代化工原料和替能源的需求越发迫切的背景下，中国的煤化工行业以其领先的产业化进度成为中国能源结构的重要组成部分，国家对于煤化工企业也给予了越来越多的重视。目前，甲醇、二甲醚、丙烯等是煤化工产业链中主要的化学品。然而，在煤制甲醇、煤制二甲醚、煤制烯烃等过程产排的废水中，因含有苯酚的存在，极大地影响了煤化工废水的处理处置效果。

酚类化合物是一种原型质毒物，对生物个体具有毒害作用。它通过皮肤及粘膜的接触而吸入或经口腔浸入生物体内，与细胞内原浆中的蛋白质接触后，形成不溶性蛋白质而使细胞失去活性，尤其对神经系统有较大的亲和力，使神经系统发生病变。目前国内外处理含酚废水的常用方法主要有物理法、化学法和生物法。当废水中的苯酚含量在5～500mg/L时，适于用生物法处理。研究表明，酵母菌、根瘤菌、醋酸钙不动杆菌、假单胞菌、真养产碱菌和反硝化菌对废水中苯酚有一定的降解效果。本方法利用驯化后的枯草芽孢杆菌降解处理煤化工废水中的苯酚，具有经济、高效的优点，更重要的是枯草芽孢杆菌为非致病菌，所以可达到无害化、无二次污染降解煤化工废水中苯酚的效果。

目前还没有一种利用驯化后的枯草芽孢杆菌降解煤化工废水中苯酚的方法。

发明内容

本发明的目的是克服现有技术的不足，提供一种投入低、操作简单的方法、且对环境不会造成二次污染的降解煤化工废水中苯酚的方法。

本发明通过如下方式实现：

一种降解煤化工废水中苯酚的方法，其特征在于：该方法包括如下步骤：

a.种子制备：从枯草芽孢杆菌保存管中挑取一环接入富集培养基中，菌株经活化和扩大培养后，按质量百分比为1~5%的接种量接种于富集培养基中，在温度为20~40℃下好氧培养24~72h，可得用于驯化的降解菌；

b.降解菌的驯化：取上述步骤a制得的种子按质量百分比1~5%的接种量接入含100mg/L苯酚的基础选择培养基中，在温度为20~40℃，搅拌速率为100~130r/min下好氧培养24~72h后，取培养后的培养液按质量百分比1~5%的接种量再接种于含200mg/L苯酚的基础选择培养基中，与上述相同条件下培养24~72h，以此类推，即取前一步骤培养后的培养液按质量百分比1~5%的接种量接种于苯酚含量比前一步骤高100mg/L的基础选择培养基中，与上述相同条件下培养24~72h，最后一次是取前一步骤接种培养后的培养液，按质量百分比1~5%的接种量接种于含1000mg/L苯酚的基础选择培养基中，与上述相同条件下培养24~72h；

c.单菌落的分离：选择上述步骤b浊度最大的培养液，稀释后涂布于含300mg/L苯酚的基础选择固体培养基琼脂平板，在温度为20~40℃下培养24~72h，长出的单菌落在平板上划线纯化2次，得到形态不同的单菌落菌株；

d.降解苯酚种子扩大培养：取上述步骤c制得的不同形态单菌落菌株，分别接入到含300mg/L苯酚的富集培养基中，在温度为20~40℃，搅拌速率为100~130r/min下好氧培养24~72h，可得用于降解苯酚的种子；

e.苯酚降解菌的选择：将上述步骤d制得的降解苯酚的种子，按质量百分比1~5%的接种量分别接入添加0、100、200、……、900、1000mg/L苯酚的煤化工废水中，在温度为20~40℃，搅拌速率100~130r/min下好氧培养24~72h后对苯酚浓度进行测定，选出使含量为0～200mg/L煤化工废水中的苯酚能完全降解的菌株；

f.将上述步骤e选出的苯酚降解菌，接入富集培养基经扩大培养后，按质量百分比1~5%的接种量接入煤化工废水中，在温度为20~40℃，搅拌速率100~130r/min下好氧培养24~72h，即可降解煤化工废水中的苯酚；

    所述富集培养基，基础选择培养基，基础选择固体培养基制备方法分别是：

1）富集培养基的制备：将下述重量的原料混合而成即可制得富集培养基：蛋白胨5.0g，牛肉浸出汁3.0g，NaCl 5.0g，MnSO₄·H₂O 0.01g，水1000mL；