[发明专利]一种基于氨基化二氧化硅纳米颗粒-CD/TK融合基因复合物的肝癌自杀基因治疗药物

权利要求书

1.一种基于氨基化二氧化硅纳米颗粒-CD/TK融合基因复合物的肝癌自杀基因治疗药物，其特征在于，具体制备方法包括如下步骤：

1)通过PCR扩增CD、TK基因并建成融合基因，并克隆到常规质粒载体中，在载体中由人源端粒酶启动子启动融合基因的表达，并采用CMV增强子来增强融合基因的转录；

2)将构建好的质粒与氨基化二氧化硅纳米颗粒混合，形成稳定的纳米-DNA复合物；

3)作为基因治疗药物用于肝癌的治疗，药物在体内或体外可转染肝癌细胞，CD/TK能在肝癌细胞中高表达，并能将前体药物5-Fc转化成毒性药物5-Fu，对肝癌细胞有明显毒性和杀伤作用。

2.根据权利要求1所述的一种基于氨基化二氧化硅纳米颗粒-CD/TK融合基因复合物的肝癌自杀基因治疗药物制备方法，其特征在于，所述步骤1)中的自杀基因CD和TK，采用融合基因的方式，并采用肝癌内高活性的端粒酶启动子；所述步骤2)中的将携带自杀基因的DNA与带负电荷、能高效地结合核酸的氨基化修饰的二氧化硅纳米颗粒结合。

3.根据权利要求1所述的一种基于氨基化二氧化硅纳米颗粒-CD/TK融合基因复合物的肝癌自杀基因治疗药物制备方法，其特征在于，端粒酶启动子的基因序列为：

Cctgtgtcaaggagcccaagtcgcggggaagtgttgcagggaggcactccgggaggtcccgcgtgcccgtccagggagcaatgcgtcctcgggttcgtccccagccgcgtctacgcgcctccgtcctccccttcacgtccggcattcgtggtgcccggagcccgacgccccgcgtccggacctggaggcagccctgggtctccggatcaggccagcggccaaagggtcgccgcacgcacctgttcccagggcctccacatcatggcccctccctcgggttaccccacagcctaggccgattcgacctctctccgctggggccctcgctggcgtccctgcaccctgggagcgcgagcggcgcgcgggcggggaagcgcggcccagacccccgggtccgcccggagcagctgcgctgtcggggccaggccgggctcccagtggattcgcgggcacagacgcccaggaccgcgcttcccacgtggcggagggactggggacccgggcacccgtcctgccccttcaccttccagctccgcctcctccgcgcggaccccgccccgtcccgacccctcccgggtccccggcccagccccctccgggccctcccagcccctccccttcctttccgcggccccgccctctcctcgcggcgcgagtttcaggcagcgctgcgtcctgctgcgcacgtgggaagccctggccccggccacccccgcg  ；

所述CMV增强子基因序列如下：

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