[发明专利]一种利用紫外分光光度法测定植物中抗坏血酸含量的方法

权利要求书

1.一种利用紫外分光光度法测定植物中抗坏血酸含量的方法，包括标准样品溶液的制备、标准曲线线性回归方程的获得、待测样品的制备、紫外检测及浓度计算，其特征在于所述的待测样品的制备、紫外检测及浓度计算包括如下步骤：

a.待测样品的制备：将每2.5～3.5g偏磷酸和7.5～8.5mL乙酸用水定容至100ml得到偏磷酸-乙酸水溶液，将该溶液与待测物匀浆，离心，取上清液即为待测物提取液；取体积相等的两份待测物提取液，用碱处理法破坏第一份待测物提取液背景的光吸收，第二份待测物提取液加入氯化钠溶液，使其含有的氯化钠浓度与第一份待测物提取液中生成的氯化钠浓度相同，待测物为不含单宁酸的植物或植物部位；

b.待测样品的紫外检测：采用紫外分光光度法测定两份样品提取液在波长为245nm下的吸光度；

c.待测样品浓度的计算：将“b”步骤测得的两次吸光度的差值作为抗坏血酸含量的测量值，代入标准曲线线性回归方程，计算出待测样品中抗坏血酸的浓度。

2.根据权利要求1所述的利用紫外分光光度法测定植物中抗坏血酸含量的方法，其特征在于步骤“a”中所述的碱处理法破坏第一份待测物提取液背景的光吸收包括以下步骤：向待测物提取液中加入浓度为1～10mol/L的氢氧化钠溶液，将提取液的pH值调节至大于12，混匀后室温放置10～30分钟，再加入浓度为1～10mol/L的盐酸将pH值调至1～2。

3.根据权利要求1所述的利用紫外分光光度法测定植物中抗坏血酸含量的方法，其特征在于所述的标准样品溶液的制备包括以下步骤：用去离子水配制5g/L的抗坏血酸溶液，用偏磷酸-乙酸溶液稀释成多个不同浓度的标准样品溶液，浓度范围为5～50mg/L。

4.根据权利要求1所述的利用紫外分光光度法测定植物中抗坏血酸含量的方法，其特征在于所述的标准曲线线性回归方程的获得是将浓度范围为5～50mg/L的多个不同浓度的标准样品溶液分别采用紫外分光光度法进行检测，检测波长为245nm，将得到的吸光度绘制标准曲线，并根据朗伯-比尔定律计算获得标准曲线线性回归方程。

5.根据权利要求1所述的利用紫外分光光度法测定植物中抗坏血酸含量的方法，其特征在于步骤“a”所述的取体积相等的两份待测物提取液再分别用偏磷酸-乙酸溶液稀释至待测物提取液体积的2～5倍。

6.根据权利要求1所述的利用紫外分光光度法测定植物中抗坏血酸含量的方法，其特征在于步骤“a”所述的匀浆时，偏磷酸-乙酸水溶液与待测物采用的比例为5ml∶0.2～1g。

7.根据权利要求1所述的利用紫外分光光度法测定植物中抗坏血酸含量的方法，其特征在于步骤“a”所述的离心的条件为10000～12000(×g)，离心10～20分钟。