[发明专利]一种桉叶脂肪酸成分测定方法

权利要求书

1.一种桉叶脂肪酸成分测定方法，其特征是按以下步骤：

(1)样品脂肪酸甲酯化或乙酯化

甲酯化：将提取物置于三角瓶中，加入浓度为1％硫酸甲醇溶液，加入量为1g/50mL，充分振荡，55℃水浴加热回流1小时，取出静置后，加入溶剂，加入量为提取物与溶剂之比1g/50mL，振荡均匀并静置30分钟，取上清液放入离心管中10000rpm下离心10分钟，离心后取上清部分作为分析试样；

乙酯化：将提取物置于三角瓶中，加入浓度为0.5mol/L的NaOH乙醇溶液，加入量为1g/10mL，充分振荡，80℃水浴加热5-10分钟，加入三氟化硼-乙醚溶液与无水乙醇配制的混合溶液，加入量为1g/20mL，80℃水浴加热10分钟，取出冷却，加入饱Nacl溶液，加入量1g/70mL，和正己烷，加入量1g/4mL，振摇混匀，静置分层，取上层液进行分析试样；所述三氟化硼-乙醚溶液与无水乙醇配制的混合溶液按体积比1∶3配制；

(2)GC-MS联用仪测定

A.色谱条件

进样口温度253℃，流速1mL/分钟，进样量1.0μL，分流比20∶1；

B.程序升温

初温80℃，保持1.1分钟，以17℃/分钟升至240℃，保持0.7分钟，再以1℃/分钟升至253℃，保持4分钟；

C.质谱条件

EI电离源，电子能量70eV，离子源温度230℃，四极杆温度150℃，EM电压1024V，质量扫描范围40～600u；

(3)标准溶液配制及标准曲线制作

配制各种浓度的标准成分溶液，以标准系列浓度为横坐标，标准目标化合物定量离子峰面积为纵坐标制作标准曲线，然后分别以GC-MS进行测定，并保证检测的GC-MS条件与所述色谱条件、程序升温及质谱条件一致；

(4)脂肪酸定性、定量分析

根据利用GC-MS谱图库进行的自动检索或根据标准成分，对脂肪酸成分进行定性分析；对色谱峰面积归一化法确定脂肪酸成分的相对百分含量或与相应的标准曲线方程比较获得含量。

2.根据权利要求1所述桉叶脂肪酸成分测定方法，其特征是所述步骤(1)样品脂肪酸甲酯化或乙酯化。

3.根据权利要求1所述桉叶脂肪酸成分测定方法，其特征是所述溶剂为正己烷。

4.根据权利要求1所述桉叶脂肪酸成分测定方法，其特征是所述步骤(4)脂肪酸定性、定量分析时，样品谱图与标准谱图库匹配度在0.9以上，与标准样品出峰时间差小于2秒。